纈草波春對(duì)非炎癥性大鼠結(jié)腸致敏模型的影響.pdf

1、目的：研究中藥提取物纈草波春對(duì)結(jié)腸激惹綜合征(Irritation bowel syndrome，IBS)非炎癥性大鼠結(jié)腸致敏模型的影響方法：實(shí)驗(yàn)1：32只雄性wastar大鼠被隨機(jī)分成4組，即鹽水對(duì)照組、模型對(duì)照組、嗎啡藥物對(duì)照組和纈草波春藥物實(shí)驗(yàn)組。大鼠用300mmol/L正丁酸鈉(C<,4>H70<,2>Na)1ml，每天2次，連續(xù)6天灌注大鼠直腸的方法制造IBS內(nèi)臟敏感模型，分別在造模的第3天和第6天用直腸擴(kuò)張的方法通過(guò)大鼠行為

2、記分、記錄初始感覺(jué)壓力閾值，最大壓力耐受閾值和用水囊通過(guò)壓力感受器記錄結(jié)腸用藥前后壓力(平均壓力、最大壓力)的改變來(lái)檢驗(yàn)大鼠結(jié)腸、直腸的敏感性。6天造模成功后，分別每天2次灌胃，每次1ml，纈草波春每天用量為25mg/KG，嗎啡亦每天2次灌胃，每次1ml，每天用量0.4mg/KG。鹽水對(duì)照組和模型對(duì)照組等量生理鹽水灌胃，作用于上述模型一周和2周，用直腸擴(kuò)張的方法通過(guò)大鼠行為記分檢驗(yàn)大鼠直腸的敏感性，用水囊通過(guò)壓力感受器記錄結(jié)腸用藥前后直

3、腸壓力改變。比較用藥前后初始?jí)毫Ω杏X(jué)閾值和最大壓力感覺(jué)閾值、結(jié)腸運(yùn)動(dòng)平均壓力和最大壓力變化。通過(guò)纈草波春對(duì)冰水激發(fā)模型的影響進(jìn)一步闡明纈草波春的作用，32只雄性Wastar大鼠被隨機(jī)分成4組，即鹽水對(duì)照組、模型對(duì)照組、嗎啡藥物對(duì)照組和纈草波春藥物實(shí)驗(yàn)組。模型制作同實(shí)驗(yàn)一，分別于造模成功后第2天和灌胃給藥7天的末次給藥1小時(shí)后采用0℃冰水2ml．灌胃1次激發(fā)結(jié)腸致敏模型，灌胃10分鐘后以機(jī)體反應(yīng)評(píng)分和結(jié)腸張力和運(yùn)動(dòng)法進(jìn)一步確定纈草波春對(duì)模

4、型的影響。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至21天觀察鹽水對(duì)照組和造模組(包括模型對(duì)照組、嗎啡實(shí)驗(yàn)組、纈草波春實(shí)驗(yàn)組)的體重、食物攝取、水?dāng)z取、尿量、糞量的變化，了解實(shí)驗(yàn)對(duì)上述各項(xiàng)生理參數(shù)的影響。藥物治療后取直腸、結(jié)腸組織觀察黏膜組織學(xué)改變，取結(jié)腸黏膜肉眼觀察、放大鏡下觀察并檢測(cè)MPO活性，取結(jié)腸組織， HE染色并予肥大細(xì)胞及噬酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)。取結(jié)腸、丘腦、海馬回組織用免疫組化的方法檢測(cè)GABA-B受體和CGRP受體的表達(dá)(未完成)。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至21天觀察

5、鹽水對(duì)照組與造模組(包括模型對(duì)照組、嗎啡實(shí)驗(yàn)組、纈草波春實(shí)驗(yàn)組)的體重、食物攝取、水?dāng)z取、尿量、糞量變化比較差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。在壓力為20，30，40，50mmHg時(shí)，第3天與第6天兩個(gè)時(shí)間段在不同壓力進(jìn)行直腸擴(kuò)張時(shí)，模型組與鹽水對(duì)照組分別比較，擴(kuò)張記分比較差異均有顯著性(P<0.01)，在第3天和第6天，20，30，40，50mmHg壓力時(shí)模型組前后積分比較，差異均有顯著性意義(P<0.01)。在壓力為0、10和60m

6、mHg時(shí)，鹽水對(duì)照組與模型組及模型組前后比較，積分差異性均無(wú)顯著性意義(P>O.05)。造模3天、6天，結(jié)腸運(yùn)動(dòng)平均壓力升高，最大壓力升高，與鹽水對(duì)照組比較，差異有顯著意義(P<0.01)。造模前后結(jié)腸黏膜無(wú)器質(zhì)性病變，造模組與鹽水對(duì)照組比較MPO活性測(cè)定、肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)均無(wú)顯著差異。用藥1周后，纈草波春組與模型對(duì)照組比較，在壓力為0，10，60mmHg時(shí)，直腸擴(kuò)張積分差異無(wú)顯著意義.(P>0.05)，在20-50mmHg時(shí)

7、差異有顯著意義(P<0.01)，與嗎啡對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.01)；纈草波春組與模型對(duì)照組比較，結(jié)腸運(yùn)動(dòng)平均壓力和最大壓力差異有顯著意義(P<0.01)，與嗎啡對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.01)：纈草波春組與模型對(duì)照組比較，初始?jí)毫Ω杏X(jué)閾值差異有顯著意義(P<0.01)，與嗎啡對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.01)。用藥2周后，纈草波春組與對(duì)照組比較，在壓力為0，10，60mmHg時(shí)，直腸擴(kuò)張積分差異無(wú)顯著意義(P>

8、0.05)，在20-50mmHg時(shí)差異有顯著意義(P<0.01)，在20-50mmHg時(shí)，與嗎啡對(duì)照組比較差異有顯著意義；纈草波春組與模型對(duì)照組比較，結(jié)腸運(yùn)動(dòng)平均壓力和最大壓力差異有顯著意義(P<0.01)，與嗎啡對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.01)。纈草波春用藥2周與1周比較，結(jié)腸運(yùn)動(dòng)平均壓力、最大壓力和在壓力為20-50mInHg時(shí)，直腸擴(kuò)張積分差異均無(wú)顯著性意義(P>0.05)。纈草波春組與模型對(duì)照組比較，初始?jí)毫Ω杏X(jué)閾值差異

9、有顯著意義(P<0.01)，與嗎啡對(duì)照組比較差異有顯著意義(P<0.01)；纈草波春組1周初始?jí)毫Ω杏X(jué)閾值與2周初始?jí)毫Ω杏X(jué)閾值比較，差異無(wú)顯著意義(P>0.05)。纈草波春應(yīng)用1周對(duì)冰水灌胃激發(fā)結(jié)腸運(yùn)動(dòng)的平均壓力影響與模型對(duì)照組及嗎啡對(duì)照組比較明顯降低，差異有顯著意義(P<0.01)；對(duì)結(jié)腸運(yùn)動(dòng)最大壓力影響與模型組比較亦顯著降低，差異有顯著意義(P<0.01)。結(jié)論：用丁酸鹽直腸灌注的方法制造IBS內(nèi)臟敏感模型符合要求，纈草波春可降低