氮氧自由基對(duì)血紅蛋白化還原反應(yīng)影響的研究.pdf

1、輸血是臨床最常用的醫(yī)療手段之一。但由于血源緊張、配型繁瑣及容易交叉感染等原因，近一個(gè)世紀(jì)以來，尋找安全有效的血液代用品，一直是醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)之一。血液代用品是兼具攜氧和擴(kuò)容功能的溶液，它必須具備原料充足、無生理毒性、無免疫源性、較好的力學(xué)流變性質(zhì)、較長(zhǎng)的保存期和易于進(jìn)行生理代謝等特點(diǎn)。血液代用品可以分為兩大類:一類是基于血紅蛋白類氧載體（Hemoglobin based oxygen carriers，HBOCs），另一類是氟碳類

2、化合物乳劑(Perfluorocarbon Compounds,PFC)。
　　HBOCs的主要成分為超純血紅蛋白。由于失去了超氧化物歧化酶(SOD)，過氧化物酶(CAT)等活性酶，該體系很容易氧化產(chǎn)生活性氧（ROS）。同時(shí)，再灌注本身也產(chǎn)生活性氧對(duì)機(jī)體造成損傷。血紅蛋白(Hb)易被活性氧氧化，形成失去攜氧能力的Fe3+Hb，并進(jìn)一步誘導(dǎo)活性氧自由基的產(chǎn)生。在過氧化氫等氧化物質(zhì)的不斷作用下，Hb不斷被氧化，F(xiàn)e3+Hb和活性氧自由

3、基形成循環(huán)，從而加速了輸血再灌注損傷，Hb的載氧能力也被極大減弱。因此這個(gè)問題亟需得到解決。
　　過去的研究發(fā)現(xiàn)，在血紅蛋白溶液中引入氮氧自由基能夠萃滅氧自由基。在這一結(jié)論的基礎(chǔ)上，本文擬探討，氮氧自由基的引入是否能同時(shí)起到還原Fe3+Hb的作用，即氮氧自由自由基是否同時(shí)具有高鐵血紅蛋白還原酶的作用。本文主要分為兩大部分:一是在血紅蛋白溶液中加入氮氧自由基，探討Fe3+Hb及氧飽和度的變化;二是在血紅蛋白表面修飾上氮氧自由基及Ma

4、l-mPEG并進(jìn)行化學(xué)表征。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:以一定濃度的血紅蛋白溶液為底物，在不脫氧和脫氧狀態(tài)下，分別加入VC/NAC、TEMPO及其還原體系，測(cè)定體系的高鐵含量和氧飽和度隨時(shí)間的變化。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，還原劑對(duì)血紅蛋白溶液的還原主要分為三個(gè)部分:一，清除溶氧;二，清除攜氧;三，還原高鐵。TEMPO的加入主要加速了前兩個(gè)部分的反應(yīng)，整體上縮短了反應(yīng)時(shí)間，但并不具備高鐵血紅蛋白還原酶的作用。采用改進(jìn)方法成功合成出了4-馬來酰亞胺哌啶氧化物，