實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞上CD137的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：建立自身免疫性肝炎小鼠模型，研究CD137分子在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞上的表達(dá)及其意義。
　　方法：采用易感動(dòng)物C57BL/6小鼠，在第1天和第7天分別以新鮮制備的S-100肝抗原0.5ml與等體積的弗氏完全佐劑充分乳化后予腹腔注射，建立自身免疫性肝炎小鼠動(dòng)物模型。于造模后第4周處死小鼠，取外周血和肝組織，進(jìn)行血生化檢查和常規(guī)病理學(xué)檢查，免疫熒光法檢測(cè)血清中的抗平滑肌抗體（SMA）、抗核抗體（ANA）。使

2、用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞上CD137的表達(dá)，ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)脾臟T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-17的濃度。
　　結(jié)果：第4周后模型組小鼠較對(duì)照組外周血血清中ALT、AST、球蛋白水平明顯升高[ALT：(80.70±18.74)U/L比(52.60±18.98)U/L；AST：(326.76±68.80)U/L比(244.99±51.56)U/L；球蛋白：(43.06±10.18)g/L比(34.00±6.90)g/L

3、，P均＜0.05]，白蛋白水平較對(duì)照組降低[(24.47±3.18)g/L比(28.16±4.83)g/L，P＜0.05]，肝臟病理組織學(xué)可見(jiàn)匯管區(qū)和肝實(shí)質(zhì)界面的炎癥，免疫熒光法可見(jiàn)血清中抗核抗體表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示活化前模型組小鼠CD4+T細(xì)胞上CD137的表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組[(7.38±2.29)％比(3.41±1.22)%，P＜0.05；]，且經(jīng)抗CD3單抗刺激后模型組CD137的表達(dá)較對(duì)照組增高顯著[(31.94±1

4、0.15)%比(11.02±1.29)%，P＜0.05]。ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果示模型組T細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-17水平高于對(duì)照組[(9.73±1.91)pg/ml比(3.05±2.00)pg/ml，P﹤0.05]，經(jīng)抗CD3單抗刺激后模型組IL-17水平較對(duì)照組顯著增高，有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[(38.60±17.51)pg/ml比(8.81±5.74)pg/ml，P﹤0.05]。
　　結(jié)論：實(shí)驗(yàn)性自身免疫性肝炎小鼠脾臟CD4+T細(xì)