母血游離胎兒DNA在21-三體、18-三體產前篩查的應用研究.pdf

1、目的：
　　 采用大規(guī)模前瞻性研究設計評價第二代測序技術對母血漿中游離胎兒DNA(cell-freefetalDNA，cffDNA)進行無創(chuàng)染色體非整倍體檢測的靈敏度和特異性。比較傳統(tǒng)血三聯(lián)篩查與第二代測序技術應用于孕中期產前篩查的檢測效率，評價第二代測序技術對母血漿中游離胎兒DNA進行無創(chuàng)染色體非整倍體篩查效率及臨床可行性。
　　 材料與方法：
　　 采用嚴格的前瞻性雙盲試驗設計，收集2011年4月-2011年

2、10月于北京協(xié)和醫(yī)院、海淀區(qū)婦幼保健院就診，且滿足≥孕11周，單胎妊娠，孕婦本人不是染色體異常患者，且孕婦在抽血當天無侵入性手術經歷，孕婦無異體輸血、移植手術、干細胞治療等經歷的孕婦外周血，應用12-plex高通量Hiseq2000平臺進行試驗，將測得的序列與人的參考基因組比對并作統(tǒng)計分析，計算各個染色體Z值，檢測胎兒染色體非整倍體異常；同時對低齡孕婦進行中孕期血清學篩查。對血清學篩查陽性或者cffDNA檢測陽性者在知情同意基礎上進行細

3、胞遺傳學診斷；高齡孕婦全部進行細胞遺傳學診斷，胎兒核型分析作為陽性樣本檢測金標準。對血清學篩查陰性與cffDNA檢測陰性者，隨訪至胎兒出生后。
　　 結果：
　　 1、本次共收入2236例孕婦，全部為單胎妊娠，其中妊娠結局隨訪數(shù)據(jù)失訪138
　　 例(6.2％);cffDNA檢測試驗失敗84例(3.8%)，其中74例有隨訪數(shù)據(jù)。有效樣本數(shù)2024例。
　　 2、中孕期血清學篩查1741例，篩查高危共249

4、例，占14.3%(249/1741)。其中21三體(Down'sSyndrome，DS)高危246例，18三體高危3例。
　　 3、cffDNA檢測收集樣本2236例，結果報告2152例，實驗失敗84例(3.8%)。cffDNA檢測檢出22例陽性：12例DS，1例T13，6例T18，2例XO，1例XXY，綜合陽性率1.02%(22/2152)。
　　 4、隨訪到妊娠結局2098例，隨訪率為93.8%。行侵入性產前診斷43

5、2例，發(fā)現(xiàn)有臨床意義的染色體異常共29例，均行引產，其中13例DS，1例T13,5例T18,5例45，X（其中一例為嵌合型），1例47，XXY。主動引產3例；發(fā)現(xiàn)胎兒多發(fā)畸形共19例，以泌尿系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)異常多見；不良妊娠結局10例，為胎死宮內、晚期難免流產，胎兒外觀均未見異常。
　　 5、cffDNA檢測檢出1例T18假陽性，1例XXY假陽性；漏診1例T21,2例45，X（其中1例試驗失?。?，1例XXY。
　　 6、

6、cffDNA檢測與傳統(tǒng)血清學篩查針對21、18、13號染色體檢測，總的假陽性率分別為0.05%(1/2005)、14.05%(243/1730)，陽性預測值94.74%(18/19)、2.41%(6/249)，檢出率94.74%(18/19)、54.55%(6/11)。
　　 7、cffDNA檢測與傳統(tǒng)血清學篩查針對21、18、13、X、Y染色體檢測，總的假陽性率0.10%(2/2000)、14.08%(243/1726)，陽性

7、預測值90.91%(20/22)、2.41%(6/249)，檢出率83.33%(20/24)、40%(6/15).
　　 8、cffDNA檢測技術檢測DS的靈敏度為92.3%(12/13)，特異度為100%(2011/2011)；檢測18、13三體綜合癥的靈敏度分別100%(5/5)、100%(1/1)，特異度為99.95%(2018/2019)、100%(2023/2023)，檢測XO、XXY靈敏度較低，特異度分別為100%(

8、2020/2020)、99.95%(2022/2023)。
　　 9、18例IVF妊娠（全部為單胎），占0.9%(18/2236)。其中1例核型為46，XY，-21，+21rob(21;21)，inv(9)，cffDNA檢測結果T21，余17例二者均未發(fā)現(xiàn)異常。
　　 結論：
　　 1、cffDNA產前檢測技術檢測常見染色體非整倍體異常T21、T18假陽性率低、檢出率高，陽性預測值較高，初步證明了cffDNA檢測