硫化氫對(duì)阿霉素致心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用研究.pdf

1、背景：
　　細(xì)胞凋亡在許多心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用，因此探明其機(jī)制并尋求一種能夠抑制其凋亡的方法可以為心血管疾病的預(yù)防及治療提供理論依據(jù)。硫化氫（hydrogen sulfide, H2S）是繼一氧化氮(nitrogen monoxidum, NO)和一氧化碳(carbon oxide, CO)之后最近發(fā)現(xiàn)的第三號(hào)內(nèi)源性氣體信號(hào)分子，在體內(nèi)多種病理生理過(guò)程發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用，尤其在心血管系統(tǒng)，H2S具有特定的生理調(diào)節(jié)作用，

2、在最近的研究中，發(fā)現(xiàn)H2S有一定的抗凋亡特性。阿霉素（doxorubicine，DOX）是一種臨床上廣泛應(yīng)用的抗腫瘤藥物，但其致心肌細(xì)胞凋亡的作用表現(xiàn)的心臟毒性大大限制了其臨床使用，研究表明阿霉素心臟毒性的靶細(xì)胞器為線粒體，最終引起心肌細(xì)胞凋亡為特征。
　　目的：
　　本實(shí)驗(yàn)主要用阿霉素引起心肌凋亡模型，以H2S預(yù)處理干預(yù)，研究H2S是否可以抑制阿霉素引起的心肌細(xì)胞凋亡及其可能存在的機(jī)制。
　　方法：
　　體外培

3、養(yǎng)的H9C2心肌細(xì)胞，以硫氫化鈉（NaHS）作為供體，實(shí)驗(yàn)細(xì)胞隨機(jī)分為四組：1.空白對(duì)照組2.阿霉素組3.阿霉素+硫氫化鈉組4.硫氫化鈉組。先用不同濃度NaHS預(yù)處理心肌細(xì)胞1小時(shí)，再加入阿霉素（DOX）致其凋亡。23小時(shí)后應(yīng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)量細(xì)胞的存活率；應(yīng)用Annexin V和PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其凋亡率變化情況；應(yīng)用比色法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3和Caspase-9的活性；加入NaHS預(yù)處理心肌細(xì)胞1小時(shí)，加入阿霉素3小

4、時(shí)后運(yùn)用western-blot法檢測(cè)信號(hào)蛋白p-ERK1/2表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　與對(duì)照組相比，阿霉素可以減少細(xì)胞存活率、增加心肌細(xì)胞凋亡率、促進(jìn) Caspase-3及Caspase-9凋亡蛋白表達(dá)、增加p-ERK1/2信號(hào)蛋白表達(dá)，H2S組可以提高心肌細(xì)胞存活率，降低阿霉素引起的心肌細(xì)胞凋亡率、抑制Caspase-3及Caspase-9凋亡蛋白表達(dá)、降低p-ERK1/2蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)論：
　　在