保健食品增加骨密度功能評價方法研究.pdf

1、目的：(1)針對《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》(2003年版)《增加骨密度功能檢驗方法》中存在的問題提出更合理的改進方案。(2)選用功效可靠的保健食品作為受試物，驗證并評價新方案的可行性。(3)研究阿基米德定律法在骨密度(bone mineral density，BMD)檢測中的應用效果，并同雙能X線吸收法(Dual energy X-ray absorptiometry，DXA)進行比較。(4)探討體重對大鼠骨密度檢測結果的影響。

2、r>　　方法：(1)對原實驗方案在標準選擇和干預時間等方面存在的問題進行了重新設定。在以補鈣增加生長發(fā)育期大鼠骨密度的方案中(方案一)增設鈣保留率和身長(從鼻尖到肛門)指標；在以調(diào)節(jié)內(nèi)分泌和骨代謝增加骨密度的方案中(方案二)，增設子宮重、子宮系數(shù)、血鈣、血磷及血清堿性磷酸酶(ALP)等指標。兩個方案均新增骨組織形態(tài)學指標，并以賦值評分法進行評價。除以上變更外，其余均按照原規(guī)范進行。(2)對15月齡自然衰老雌性大鼠和青年去勢大鼠進行比較研

3、究，分析青年去勢大鼠低骨密度模型的可靠性。(3)使用阿基米德定律法和DXA法對股骨密度進行平行測定，探討將阿基米德定律法應用于小動物骨密度測定的可行性。(4)使用協(xié)方差分析控制體重對大鼠骨密度的影響，研究體重對骨密度結果是否具有干擾作用。
　　結果：(1)在方案一中，鈣表觀吸收率顯示各組大鼠對鈣的吸收情況存在組間差異，鈣保留率則表明各組大鼠對鈣的實際吸收代謝能力相差不大。干預一個月后，阿基米德定律法所測BMD結果表明受試物具有增加

4、骨密度的功能，生長發(fā)育指標中僅身長數(shù)據(jù)支持這一結論；DXA法骨密度、骨鈣含量及骨組織病理學指標不能表明受試物具有增加骨密度功效；按方案一干預三個月后，各組大鼠身長、股骨長的差異不顯著(P>0.05)。體重、股骨重、骨密度、骨鈣含量及骨組織形態(tài)學指標一致表明受試物具有明確的增加骨密度功效。(2)在方案二中，青年去勢大鼠的骨質(zhì)疏松模型造模成功。骨密度、子宮系數(shù)、血磷、ALP及大部分骨組織形態(tài)學指標均顯示受試物具有增加骨密度的作用，血生化指標

5、等新增指標的結果比BMD及骨鈣含量的結果更為明確，而生長發(fā)育指標在方案二中的應用意義不大：老年大鼠實驗結果表明，股骨重、骨密度、子宮系數(shù)、血生化指標及骨組織形態(tài)學指標顯示受試物干預三個月后表現(xiàn)出了增加骨密度的功效；青年去勢大鼠同自然衰老大鼠在骨質(zhì)疏松的各指標水平上存在一定的差異。(3)DXA法同阿基米德定律法的骨密度檢測結果顯示，僅老年大鼠在股骨遠心端及股骨中點處骨密度結果相關性較差，其余10個位點的骨密度值均呈較好的正相關關系，相關系

6、數(shù)最小值為0.618。(4)分析大鼠體重和骨密度的關系后發(fā)現(xiàn)，僅在老年大鼠組的“股骨中點”及“整根股骨”兩個位點處，協(xié)變量“體重”對反應變量“骨密度”的影響是顯著的(P<0.05)，對其余骨密度值的統(tǒng)計分析中并未觀察到體重對大鼠骨密度結果存往影響。
　　結論：(1)方案一干預一個月后出現(xiàn)的陽性指標過少，干預三個月后絕大部分指標均表明受試物具有增加骨密度的功效，建議按照三個月進行實驗。(2)方案二中，血磷、ALP等血生化指標及骨細織

7、形態(tài)學指標同骨密度及骨鈣含量的結果基本一致，具有區(qū)分相關保健食品增加骨密度功效的作用，可以加入保健食品增加骨密度功效評價程序中。(3)青年去勢大鼠和老年大鼠在骨密度、骨鈣含量等指標方面存在一定差異；綜合考慮各指標靈敏度及實驗成本，在條件允許的情況下可優(yōu)先選擇老年大鼠，若選用青年去勢大鼠時應適當延長干預時間。(4)阿基米德定律法及DXA法均可應用于骨密度測定中：測定大鼠離體股骨BMD時，阿基米德定律法的靈敏度好于DXA法。(5)評價保健食