保健食品增加骨密度功能評(píng)價(jià)方法研究.pdf

1、目的：(1)針對(duì)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)《增加骨密度功能檢驗(yàn)方法》中存在的問(wèn)題提出更合理的改進(jìn)方案。(2)選用功效可靠的保健食品作為受試物，驗(yàn)證并評(píng)價(jià)新方案的可行性。(3)研究阿基米德定律法在骨密度(bone mineral density，BMD)檢測(cè)中的應(yīng)用效果，并同雙能X線吸收法(Dual energy X-ray absorptiometry，DXA)進(jìn)行比較。(4)探討體重對(duì)大鼠骨密度檢測(cè)結(jié)果的影響。

2、r>　　方法：(1)對(duì)原實(shí)驗(yàn)方案在標(biāo)準(zhǔn)選擇和干預(yù)時(shí)間等方面存在的問(wèn)題進(jìn)行了重新設(shè)定。在以補(bǔ)鈣增加生長(zhǎng)發(fā)育期大鼠骨密度的方案中(方案一)增設(shè)鈣保留率和身長(zhǎng)(從鼻尖到肛門(mén))指標(biāo)；在以調(diào)節(jié)內(nèi)分泌和骨代謝增加骨密度的方案中(方案二)，增設(shè)子宮重、子宮系數(shù)、血鈣、血磷及血清堿性磷酸酶(ALP)等指標(biāo)。兩個(gè)方案均新增骨組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)，并以賦值評(píng)分法進(jìn)行評(píng)價(jià)。除以上變更外，其余均按照原規(guī)范進(jìn)行。(2)對(duì)15月齡自然衰老雌性大鼠和青年去勢(shì)大鼠進(jìn)行比較研

3、究，分析青年去勢(shì)大鼠低骨密度模型的可靠性。(3)使用阿基米德定律法和DXA法對(duì)股骨密度進(jìn)行平行測(cè)定，探討將阿基米德定律法應(yīng)用于小動(dòng)物骨密度測(cè)定的可行性。(4)使用協(xié)方差分析控制體重對(duì)大鼠骨密度的影響，研究體重對(duì)骨密度結(jié)果是否具有干擾作用。
　　結(jié)果：(1)在方案一中，鈣表觀吸收率顯示各組大鼠對(duì)鈣的吸收情況存在組間差異，鈣保留率則表明各組大鼠對(duì)鈣的實(shí)際吸收代謝能力相差不大。干預(yù)一個(gè)月后，阿基米德定律法所測(cè)BMD結(jié)果表明受試物具有增加

4、骨密度的功能，生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)中僅身長(zhǎng)數(shù)據(jù)支持這一結(jié)論；DXA法骨密度、骨鈣含量及骨組織病理學(xué)指標(biāo)不能表明受試物具有增加骨密度功效；按方案一干預(yù)三個(gè)月后，各組大鼠身長(zhǎng)、股骨長(zhǎng)的差異不顯著(P>0.05)。體重、股骨重、骨密度、骨鈣含量及骨組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)一致表明受試物具有明確的增加骨密度功效。(2)在方案二中，青年去勢(shì)大鼠的骨質(zhì)疏松模型造模成功。骨密度、子宮系數(shù)、血磷、ALP及大部分骨組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)均顯示受試物具有增加骨密度的作用，血生化指標(biāo)

5、等新增指標(biāo)的結(jié)果比BMD及骨鈣含量的結(jié)果更為明確，而生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)在方案二中的應(yīng)用意義不大：老年大鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，股骨重、骨密度、子宮系數(shù)、血生化指標(biāo)及骨組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)顯示受試物干預(yù)三個(gè)月后表現(xiàn)出了增加骨密度的功效；青年去勢(shì)大鼠同自然衰老大鼠在骨質(zhì)疏松的各指標(biāo)水平上存在一定的差異。(3)DXA法同阿基米德定律法的骨密度檢測(cè)結(jié)果顯示，僅老年大鼠在股骨遠(yuǎn)心端及股骨中點(diǎn)處骨密度結(jié)果相關(guān)性較差，其余10個(gè)位點(diǎn)的骨密度值均呈較好的正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系

6、數(shù)最小值為0.618。(4)分析大鼠體重和骨密度的關(guān)系后發(fā)現(xiàn)，僅在老年大鼠組的“股骨中點(diǎn)”及“整根股骨”兩個(gè)位點(diǎn)處，協(xié)變量“體重”對(duì)反應(yīng)變量“骨密度”的影響是顯著的(P<0.05)，對(duì)其余骨密度值的統(tǒng)計(jì)分析中并未觀察到體重對(duì)大鼠骨密度結(jié)果存往影響。
　　結(jié)論：(1)方案一干預(yù)一個(gè)月后出現(xiàn)的陽(yáng)性指標(biāo)過(guò)少，干預(yù)三個(gè)月后絕大部分指標(biāo)均表明受試物具有增加骨密度的功效，建議按照三個(gè)月進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(2)方案二中，血磷、ALP等血生化指標(biāo)及骨細(xì)織

7、形態(tài)學(xué)指標(biāo)同骨密度及骨鈣含量的結(jié)果基本一致，具有區(qū)分相關(guān)保健食品增加骨密度功效的作用，可以加入保健食品增加骨密度功效評(píng)價(jià)程序中。(3)青年去勢(shì)大鼠和老年大鼠在骨密度、骨鈣含量等指標(biāo)方面存在一定差異；綜合考慮各指標(biāo)靈敏度及實(shí)驗(yàn)成本，在條件允許的情況下可優(yōu)先選擇老年大鼠，若選用青年去勢(shì)大鼠時(shí)應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)干預(yù)時(shí)間。(4)阿基米德定律法及DXA法均可應(yīng)用于骨密度測(cè)定中：測(cè)定大鼠離體股骨BMD時(shí)，阿基米德定律法的靈敏度好于DXA法。(5)評(píng)價(jià)保健食