LPS誘導抑郁模型小鼠前額葉的蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、研究背景：
　　抑郁癥作為一種發(fā)病原因復雜的精神疾病，以持久的心境低落為特征，其高患病率、高復發(fā)率和高自殺率，給患者及其家庭乃至全社會都造成了沉重的負擔。在世界范圍內(nèi)，幾乎每四分之一女性和六分之一男性，在一生中的不同時期，都曾不同程度的遭受過抑郁癥的困擾。大量臨床以及基礎(chǔ)研究實驗數(shù)據(jù)顯示，抑郁癥與炎癥反應之間存在著緊密聯(lián)系；且抑郁癥患者腦功能成像、抑郁癥動物模型前額葉的蛋白質(zhì)組學和代謝組學研究也顯示：抑郁癥患者存在前額葉結(jié)構(gòu)和（或

2、）功能紊亂。
　　目的：
　　本研究旨在運用蛋白質(zhì)組學技術(shù)手段，對 lipopolysaccharide（LPS）誘導所建立的抑郁癥模型小鼠前額葉的蛋白質(zhì)表達譜進行研究，進一步探討抑郁癥疾病狀態(tài)下可能的前額葉蛋白質(zhì)組學變化，為進一步揭示抑郁癥的疾病機理提供幫助。
　　方法：
　　48只成年雄性Crl：CD1（ICR）小鼠，隨機分為對照組（生理鹽水腹腔注射，1ml/kg體重）、急性炎癥反應組（LPS腹腔注射，0.8

3、3mg/kg體重）、抑郁樣行為組（LPS腹腔注射，0.83mg/kg體重）。針對急性炎癥反應組，于LPS注射6h后進行行為學評價。同理，針對抑郁樣行為組，檢測LPS注射前、后的體重變化，并于注射24h后進行行為學評價。取30只（n=10/組）小鼠前額葉進行雙向凝膠電泳（Two-dimensional gel electrophoresis，2-DE），針對所獲取的差異蛋白點進行基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）

4、分析，并對差異蛋白進行生物學功能分類。取18只（n=6只/組）小鼠前額葉對差異蛋白用進行Western blot（WB）驗證。
　　結(jié)果：
　　1.在曠野實驗中，急性炎癥反應組的總移動距離相對于對照組明顯降低；較之于LPS注射前，抑郁樣行為組小鼠的體重明顯降低；在懸尾實驗和強迫游泳實驗中，抑郁樣行為組的不動時間均較對照組有明顯延長。上述差異均具有統(tǒng)計學意義，說明LPS誘導急性炎癥反應模型以及LPS誘導抑郁樣癥模型構(gòu)建成功，并

5、且抑郁樣行為與急性炎癥反應相互獨立。
　　2.經(jīng)雙向凝膠電泳對小鼠前額葉蛋白質(zhì)組進行分離，對差異蛋白點進行質(zhì)譜鑒定，最終得到26個差異蛋白。
　　3.經(jīng)生物學功能歸類分析得知，所獲取的差異蛋白主要為能量代謝相關(guān)、神經(jīng)發(fā)生、細胞骨架、信號轉(zhuǎn)導、氧化還原相關(guān)、核酸代謝相關(guān)以及分子伴侶等相關(guān)蛋白。
　　4.經(jīng)WB驗證，腦型肌酸激酶（Creatine kinase B-type, CKB）的表達量在抑郁樣行為組中有明顯上調(diào)；二

6、氫嘧啶酶相關(guān)蛋白3（Dihydropyrimidinase-related protein3, DPYSL3）的表達量在抑郁樣行為組中有明顯上調(diào)，差異均具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論：
　　1.LPS腹腔注射可成功誘導小鼠產(chǎn)生急性炎癥反應以及抑郁樣行為，并成功建立急性炎癥反應以及抑郁樣行為動物模型。
　　2.前額葉中差異表達的CKB和DPYSL3兩種蛋白，分別與能量代謝紊亂和神經(jīng)發(fā)生等過程有關(guān)，這些發(fā)現(xiàn)可以為探索以及揭示抑