地西他濱聯(lián)合曲古抑菌素A對(duì)SKM-1 MDS細(xì)胞株的體外研究.pdf

1、目的：本研究探討去甲基化制劑地西他濱(5-aza-2'-deoxycytidine，Decitabine)和(或)組蛋白去乙酰化酶抑制劑曲古抑菌素A(TSA，TrichostatinA)對(duì)MDS-RAEB細(xì)胞株SKM.1株的體外影響以及機(jī)制。 方法： 1.用臺(tái)酚藍(lán)拒染法研究地西他濱和(或)TSA對(duì)SKM-1細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)的影響。 2.用NBT(硝基四氮唑藍(lán))還原試驗(yàn)研究地西他濱和(或)TSA對(duì)SKM.1細(xì)胞分化作用

2、。 3.用流式細(xì)胞技術(shù)研究地西他濱和(或)TSA作用前后，SKM-1細(xì)胞株表面分化抗原的變化。 4.用AnnexinV-FITC標(biāo)記地西他濱和(或)TSA作用后的SKM-1細(xì)胞，并用流式細(xì)胞儀分析，了解其早期凋亡的情況。 5.用RT-PCR研究地西他濱和(或)TSA作用前后，SKM.1細(xì)胞Fas和P15INK4B基因表達(dá)的變化，了解藥物對(duì)細(xì)胞凋亡和分化的影響。 結(jié)果： 1.地西他濱和(或)TSA對(duì)

3、SKM-1細(xì)胞有生長(zhǎng)抑制作用(P＜0.05)。 2.地西他濱和(或)TSA能促進(jìn)SKM-1細(xì)胞分化。SKM-1細(xì)胞經(jīng)1.6-6.4mmol/L的地西他濱或50-200nmol/L的TSA處理5天后，NBT還原能力明顯增加(P＜O.01)，兩藥聯(lián)用高于單藥(P＜O.01)。 3.經(jīng)1.6-6.4mmol/L的地西他濱或50-200nmol/L的TSA處理5天后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)到SKM-1細(xì)胞表面CDl4、CDllb表達(dá)增加

4、(P＜O.01，P＜0.05)，HLA-DR表達(dá)減少(P＜O.01，P＜0.05)。兩藥聯(lián)用高于單藥(P<0.05)。 4.流式細(xì)胞儀分析經(jīng)1.6-6.4mmol/L地西他濱或100-200nmol/L的TSA處理后，SKM.1細(xì)胞凋亡增加(P＜O.01,P<0.01)，有劑量依賴(lài)(P＜0.05，P＜0.01)，兩藥有協(xié)同性(P＜O.01)。 5.經(jīng)3.2-6.4mmol/L的地西他濱或50-200nmol/L的TSA處

5、理5天后，細(xì)胞FasmRNA表達(dá)增加(P