OPN、MMP-9、和MVD與垂體腺瘤侵襲性的相關性研究.pdf

1、目的：垂體腺瘤是一種臨床常見的良性顱內(nèi)腫瘤，發(fā)病率大約為1/10萬～7/10萬，約占顱內(nèi)腫瘤的10％-15％，僅次于膠質瘤和腦膜瘤。垂體腺瘤一般呈局限性生長，但部分垂體腺瘤的生長可呈侵襲性，即侵襲性垂體腺瘤。侵襲性垂體腺瘤是指腫瘤生長侵襲周圍的硬膜、血管、神經(jīng)、海綿竇、鞍區(qū)骨質等，手術全切除十分困難，導致術后腫瘤殘余和較高的復發(fā)率，患者預后較差。垂體腺瘤的侵襲性是針對垂體腺瘤治療上的一個熱點和難點。
　　 目前針對垂體腺瘤侵襲性

2、的診斷多依靠患者臨床癥狀，影像學檢查腫瘤有無破壞顱底骨質、侵犯海綿竇、包繞頸內(nèi)動脈、視神經(jīng)受壓程度等，術中觀察有無侵犯硬膜、骨質、視神經(jīng)、頸內(nèi)動脈等以及術中活檢硬膜或鞍區(qū)骨質。但上述方法仍然存在較大的局限性，尤其腫瘤早期，瘤體較小的侵襲性垂體腺瘤，僅憑上述標準難以作出正確的診斷，而不能采取積極有效的綜合治療措施。
　　 骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是一種磷酸化的分泌性蛋白，其受體包括整合素和CD34受體。大量研究證

3、實，OPN與許多腫瘤的大小、生長、浸潤、轉移和預后等有關，是一種新的腫瘤標記物?；|金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）是基質金屬蛋白酶家族中分子量最大且最重要的蛋白酶，其底物主要有Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原、明膠及彈性纖維組成。MMP-9能夠破壞細胞基底膜和細胞外基質（ECM），維持ECM的生理動態(tài)平衡，從而促進腫瘤的侵潤與轉移。在顱內(nèi)腫瘤尤其垂體腺瘤的發(fā)生及侵襲過程中起著重要作用，在判斷垂體腺

4、瘤的侵襲性方面具有也有特異性。腫瘤生長依賴于血管生成，微血管密度（microvessel density，MVD）計數(shù)被認為是能反映腫瘤血管生成的一個指標，也是反映腫瘤生物學行為的一個重要指標。MVD與實體腫瘤的生長、復發(fā)及預后密切相關，MVD值增高提示預后往往不良。
　　 本試驗應用免疫組織化學技術檢測侵襲性垂體腺瘤和非侵襲性垂體腺瘤中OPN、MMP-9及MVD表達水平的差異，初步研究OPN、MMP-9、MVD三者與垂體腺瘤及

5、其侵襲性的關系，探討三者之間的相關性，為今后垂體腺瘤的診斷、治療及預后提供一條可能的新途徑。
　　 材料和方法：收集來自于2006年10月至2007年8月間河北醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院神經(jīng)外科手術切除的30例垂體腺瘤和3例腦外傷減壓術正常腦組織標本。30例垂體腺瘤標本中，女性19例，男性11例。年齡16～69歲，平均年齡42歲。依據(jù)術前影像學檢查及術中觀察腫瘤組織有無侵犯鄰近結構，將30例垂體腺瘤分為侵襲性組17例，非侵襲性組13例

6、。
　　 應用免疫組織化學S-P法對30例垂體腺瘤和3例正常腦組織標本中OPN、MMP-9及MVD的表達分別進行檢測，主要包括標本固定、蠟塊包埋、組織切片；脫蠟和水化；抗原修復；滴加一抗；滴加二抗；脫水、透明、封片、鏡檢。
　　 實驗測得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（x±S）表示。應用SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計分析，其中OPN、MMP-9分別采用Crosstabs Test（卡方檢驗），MVD采用Independent-Samp

7、les TTest（獨立樣本T檢驗）。OPN、MMP-9之間的相關性采用Spearman等級相關分析。OPN與MVD、MMP-9與MVD之間的相關性分別作直線相關回歸分析，并用t檢驗分別檢測其顯著性。檢驗水準：α=0.05。
　　 結果：OPN在正常腦組織中呈陰性表達，腫瘤細胞中OPN的表達主要定位于細胞胞漿，非侵襲性垂體腺瘤和侵襲性垂體腺瘤中均有表達，且侵襲性垂體腺瘤明顯高于非侵襲性垂體腺瘤（X2=6.652，P<0.01）；

8、MMP-9在正常腦組織中呈陰性表達，腫瘤細胞中MMP-9的表達主要定位在腫瘤細胞胞質，MMP-9在侵襲性垂體腺瘤組中的表達明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組（X2=8.167，P<0.01）；在腫瘤細胞中FactorⅧ抗體的陽性染色位于血管內(nèi)皮細胞上，侵襲性垂體腺瘤組的MVD計數(shù)顯著高于非侵襲性垂體腺瘤組（t=3.581，P<0.01）。在侵襲性垂體腺瘤中OPN與MMP-9的表達具有顯著相關性（rs=0.813，p<0.01）；侵襲性垂體腺瘤中

9、OPN表達與MVD計數(shù)之間具有顯著相關性（r=0.716，p<0.01）；同時侵襲性垂體腺瘤中MMP-9的表達與MVD計數(shù)也具有顯著相關性（r=0.783，p<0.01）。
　　 結論：侵襲性垂體腺瘤組與非侵襲性垂體腺瘤組在性別及平均年齡上無顯著差異：P>0.05。
　　 1、與非侵襲性垂體腺瘤相比，在侵襲性垂體腺瘤組中OPN、MMP-9均呈高表達且兩者之間有相關性，說明OPN、MMP-9共同參與了垂體腺瘤侵襲性，具有協(xié)

10、同作用。
　　 2、侵襲性垂體腺瘤組中MVD計數(shù)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤組，提示垂體腺瘤的侵襲性與血管生成密切相關。侵襲性垂體腺瘤中OPN、MMP-9的表達與MVD計數(shù)呈正相關，提示OPN、MMP-9可能通過參與了腫瘤微血管的生成，從而促進腫瘤的生長與侵襲。
　　 3、OPN、MMP-9、MVD與垂體腺瘤的侵襲性密切相關，一定程度上可作為評價垂體腺瘤侵襲性及其預后的輔助指標，通過檢測手術切除的垂體腺瘤標本中OPN、MMP