基于Th17-Treg失衡的補正益氣消癥方對肺癌免疫調(diào)節(jié)的臨床與基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：
　　觀察臨床肺癌患者Th17/Treg失衡的特征，觀察補正益氣消癥方對Lewis C57BL/6肺癌小鼠的免疫功能調(diào)節(jié)作用，為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)的試驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測法觀察臨床肺癌患者血清中Th17、Treg細胞的特征性表面標記物以及相關(guān)影響因子的表達情況。
　　2.采用高頻彩色超聲實驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和免疫組化等為手段，評價補正益氣消癥方

2、對C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制和免疫功能調(diào)節(jié)作用。
　　3.采用高頻彩色超聲實驗、蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)以及免疫組化作為分析手段，以半枝蓮為模型藥物，評價半枝蓮中總黃酮和總生物堿對C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制和免疫調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)果：
　　1.臨床肺癌患者分期與Th17、Treg相關(guān)性研究:腺癌組與鱗癌組患者外周血中RORγt、Foxp3、IL-

3、6、TGF-β1、IL-10均升高。RORγt/Foxp3比值越高，腫瘤的分期越高，呈正相關(guān);IL-10與RORγt/Foxp3比值呈正相關(guān)，分期越高，IL-10濃度越高，RORΥt/Foxp3比值越高;IL-6與RORγt/Foxp3比值呈正相關(guān)，分期越高，IL-6濃度越高，RORγt/Foxp3比值越高;在腺癌組和鱗癌組中，TGF-β1與RORΥt/Foxp3比值呈正相關(guān)，分期越高，TGF-β1濃度越高。從RORγt、Foxp3的變

4、化，可以推測肺癌患者外周血中Th17細胞和Treg細胞比例均升高且成正向直線相關(guān)的關(guān)系，且Treg/Th17較健康人升高明顯。提示肺癌患者可能存在Treg/Th17比例失衡，以Th17細胞升高相對占優(yōu)勢。通過調(diào)控Th17/Treg失衡可能改善肺癌患者的免疫功能。
　　2.補正益氣消癥方對Lewis C57BL/6肺癌小鼠免疫調(diào)節(jié)研究:補正益氣消癥方可顯著抑制Lewis C57BL/6肺癌小鼠腫瘤容積以及瘤重;增強胸腺和脾指數(shù);降低

5、肺癌小鼠血清中RORγt、IL-17、IL-6、Foxp3、IL-10和TGF-β1的含量，提高IL-2和IFN-γ的含量(p＜0.05)。體動物實驗結(jié)果充分表明補正益氣消癥方可通過調(diào)控Th17/Treg失衡達到抑制肺癌腫瘤生長的目的。
　　3.組方中的半枝蓮對Lewis C57BL/6肺癌小鼠免疫調(diào)節(jié)活性研究:半枝蓮總生物堿和總黃酮能夠顯著降低脾組織和血清中RORγt、IL-17、IL-6、Foxp3、IL-10和TGF-β1的

6、水平，并能顯著升高IL-2和IFN-γ的水平。本部分結(jié)果表明，半枝蓮抑制肺癌腫瘤生長與其調(diào)控Th17/Treg失衡作用密切相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.肺癌隨著分期的進展，Th17/Treg失衡現(xiàn)象愈發(fā)明顯，其機制可能與腫瘤自身產(chǎn)生的細胞因子變化關(guān)聯(lián)較大。RORγt/Foxp3的比例可以作為早期診斷的輔助觀察指標，同時也可以參考判斷預(yù)后。
　　2.補正益氣消癥方可顯著抑制肺癌腫瘤的生長，可顯著調(diào)控荷瘤小鼠Th17/Tre