TLR4在內(nèi)毒素致大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌中的作用研究.pdf

1、本研究分為三部分：第一部分：內(nèi)毒素致大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌的研究目的觀察細菌內(nèi)毒素(LPS)誘發(fā)大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌的作用及其特點，并探討肺炎癥與黏液分泌發(fā)生的相互關系。 方法：SPF級SD大鼠24只，隨機分為2組，LPS組和生理鹽水組各12只。通過檢測LPS組大鼠氣管注入LPS后第2、4、7天肺組織炎癥指標包括肺炎癥積分、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中性粒細胞計數(shù)、巨噬細胞計數(shù)、TNF-α、IL-1β及IL-8含量和

2、氣道黏液分泌指標包括肺組織阿先藍一過碘酸雪夫(AB-PAS)陽染面積、免疫組化黏蛋白Muc5ac及逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)MucSacmRNA的表達，對LPS誘發(fā)大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌的改變進行動態(tài)觀察。 結果：與生理鹽水對照組比較，LPS組肺炎癥反應指標于第2天上升到高峰，第4天和第7天逐漸下降；氣道黏液分泌指標于第2天開始升高，第4天達到高峰，第7天下降。 結論：氣管注入LPS可誘發(fā)大鼠肺炎癥和氣道黏

3、液高分泌，并呈現(xiàn)動態(tài)變化，肺炎癥反應的高峰(第2天)早于氣道黏液分泌的高峰(第4天)，肺炎癥反應可能伴隨并導致氣道黏液高分泌的發(fā)生。 第二部分：TLR4在內(nèi)毒素致大鼠肺炎癥中的作用及地塞米松干預治療的研究目的觀察TLR4、TLR2在LPS致大鼠肺炎癥中的作用及地塞米松干預的影響，并探討其可能的機制。 方法：SPF級SD大鼠48只，隨機分為4組，LPS組、地塞米松干預組、生理鹽水組和地塞米松自身對照組各12只。檢測各組大鼠

4、在干預后第2、4、7天肺組織炎癥指標包括肺炎癥積分、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中性粒細胞計數(shù)、巨噬細胞計數(shù)、TNF-α、IL-1β及IL-8含量和肺組織免疫組化TLR4、TLR2表達及RT-PCRTLR4mRNA、TLR2mRNA表達以及肺組織TLR4mRNA原位雜交檢測。 結果：肺組織TLR4蛋白及TLR4mRNA表達于LPS刺激后第2天上升達到高峰，第4天和第7天明顯下降。地塞米松干預組肺組織炎癥指標和肺組織TLR4蛋白、

5、TLR4mRNA表達于LPS刺激后第2、4、7天均較LPS組明顯下降(P＜0.05)。地塞米松自身對照組和生理鹽水組肺組織炎癥指標和肺組織TLR4蛋白、TLR4mRNA表達的組間差異無統(tǒng)計學意義。肺組織TLR2蛋白、TLR2mRNA表達在各組未檢出。 結論：LPS誘導肺組織TLR4表達介導肺炎癥反應，地塞米松可以抑制肺組織TLR4mRNA及其蛋白的表達而減輕LPS誘發(fā)的大鼠肺炎癥反應。TLR2可能未參與LPS誘發(fā)的大鼠肺炎癥損傷

6、反應。 第三部分：TLR4在內(nèi)毒素致大鼠氣道黏液高分泌中的作地塞米松干預治療的研究目的觀察TLR4在LPS致大鼠氣道黏液高分泌中的作用及地塞米松干預的影響，并探討其可能的機制。 方法：SPF級SD大鼠48只，隨機分為4組，LPS組、地塞米松干預組、生理鹽水組和地塞米松自身對照組各12只。檢測各組大鼠在干預后第2、4、7天肺組織AB-PAS陽染面積、免疫組化黏蛋白Muc5ac及RT-PCRMuc5acmRNA表達等氣道黏液

7、分泌指標和肺組織免疫組化TLR4、TLR2表達及RT-PCRTLR4mRNA、TLR2mRNA表達。 結果：LPS組氣道黏液分泌指標AB-PAS陽染面積、黏蛋白Muc5ac及Muc5acmRNA表達于LPS刺激后第2天上升，第4天達到高峰，第7天下降。地塞米松干預組氣道黏液分泌指標和肺組織TLR4蛋白、TLR4mRNA表達于LPS刺激后第2、4、7天均較LPS組明顯下降。地塞米松自身對照組和生理鹽水組氣道黏液分泌指標和肺組織TL