內(nèi)毒素膜受體TLR4、CD14與炎癥反應的基礎與臨床研究.pdf

1、第一部分,TLR4基因多態(tài)性的研究.目的:基因學研究發(fā)現(xiàn)人類TLR4基因第四外顯子第896位的A/G錯義突變可導致TLR4蛋白299位的天冬氨酸被甘氨酸取代(也稱"Asp299Gly"基因多態(tài)性),并導致TLR4受體的細胞外域發(fā)生改變.國外有關研究發(fā)現(xiàn)這一單核苷酸多態(tài)性(SNP)可影響LPS的信號轉導,被認為可能在人類對內(nèi)毒素的反應及膿毒癥的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用,具有重要的研究價值.由于突變攜帶者在人群中比例很低,要在人群中開展這

2、方面的研究,首先必須建立一種適合較大規(guī)模地檢測、方便、快速的內(nèi)毒素膜受體TLR4基因多態(tài)性"Asp299Gly"的方法,以便進一步研究該位點對人內(nèi)毒素反應及膿毒癥病人病理生理的影響.第二部分,外周血體外培養(yǎng)加內(nèi)毒素刺激的實驗研究.目的:建立用于人類內(nèi)毒素反應研究的全血細胞培養(yǎng)加內(nèi)毒素刺激的實驗模型,觀察不同濃度內(nèi)毒素刺激對全血細胞產(chǎn)生細胞因子TNFα、IL-6、IL-10的影響,觀察不同濃度的內(nèi)毒素刺激對單核細胞表面TLR4、CD14蛋

3、白的影響,了解內(nèi)毒素反應的分子機制.第三部分,圍術期內(nèi)毒素受體TLR4、CD14及細胞因子的變化.目的:圍術期炎癥細胞因子的變化被認為與臨床預后息息相關,而內(nèi)毒素膜受體被認為是炎癥反應的重要初始環(huán)節(jié),是炎癥信號轉導最上游的關鍵分子,因此圍術期內(nèi)毒素膜受體的變化及調(diào)控機制的闡明對深入研究和探索圍術期炎癥反應的分子機制有著非常重要的意義,可能為我們提供新思路,為防治過敏性炎癥反應及免疫失衡,合理調(diào)控免疫反應,為術后膿毒癥、多臟器功能衰竭等嚴