解偶聯(lián)蛋白2在高鹽誘導(dǎo)的血管功能障礙中的作用.pdf

1、背景和目的:
　　 高鹽攝入與高血壓及其相關(guān)心血管疾病和靶器官損害之間的關(guān)系已經(jīng)引起社會各界的廣泛關(guān)注。大量流行病學(xué)調(diào)查顯示鹽的攝入量與血壓水平和靶器官損害呈顯著正相關(guān),而將每日食鹽攝入量降至6g以下則能將收縮壓降低2-8mmHg。個體對鹽的敏感性存在明顯的差異,而哪些因素調(diào)控著鹽的敏感性尚不清楚,探索鹽敏感性的潛在分子機(jī)制將有可能找到鹽敏感性高血壓和血管功能障礙的防治靶點,也有利于制定限鹽治療策略的個體化方案。
　　

2、有證據(jù)表明鹽的敏感性與氧化應(yīng)激(oxidative stress)反應(yīng)的增強(qiáng)和超氧陰離子(superoxide anion)產(chǎn)生的增加密切相關(guān)。超氧陰離子淬滅具有血管保護(hù)作用的一氧化氮(nitric oxide,NO)是導(dǎo)致血壓升高和血管功能障礙的重要因素,這提示調(diào)控氧化應(yīng)激的酶系或蛋白可能參與了高鹽誘導(dǎo)的血管損害。表達(dá)于線粒體內(nèi)膜上的解偶聯(lián)蛋白2(uncoupling protein2,UCP2)可通過降低氫離子跨膜勢能,從而降低氧化

3、應(yīng)激和減少超氧陰離子的產(chǎn)生。也有研究報道顯示人UCP2的基因多態(tài)性與高血壓患病率增加具有顯著的相關(guān)性。這些證據(jù)提示UCP2可能與鹽誘導(dǎo)的高血壓和血管功能損害相關(guān)。
　　 為明確UCP2在高鹽攝入誘導(dǎo)的血壓升高和血管功能損害中的作用,本研究擬采用UCP2基因敲除(UCP2-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠來研究這一問題。比較高鹽攝入對UCP2-/-小鼠和WT小鼠血壓及血管功能影響的差異,并明確血管組織中超氧陰離子的產(chǎn)生與NO的水平是

4、否與血管功能損害的程度相一致。
　　 材料與方法:
　　 將2月齡健康雄性UCP2-/-小鼠和WT小鼠分為含食鹽0.5％的正常食鹽飲食組(normal-salt diet,NS,n=12)和含食鹽8％的高鹽飲食組(high-salt diet,HS,n=12)進(jìn)行飼養(yǎng),自由攝取自來水,干預(yù)24周后檢測如下指標(biāo):
　　 1、采用RT-PCR對小鼠主動脈和腸系膜阻力動脈中UCP2的mRNA進(jìn)行檢測;
　　 2

5、、測量清醒小鼠的鼠尾動脈無創(chuàng)收縮壓;
　　 3、測量頸動脈介入平均血壓;
　　 4、檢測腸系膜阻力動脈對苯腎上腺素(phenylephrine,PE)、乙酰膽堿(acetylcholine,Ach)和硝酸甘油(nitroglycerin,NTG)的反應(yīng)性;
　　 5、采用熒光染料Dihydroethidium(DHE)檢測主動脈組織和腸系膜阻力動脈內(nèi)膜面中的超氧陰離子水平;
　　 6、采用熒光染料DAF-

6、2DA檢測主動脈組織和腸系膜阻力動脈內(nèi)膜面中的NO水平。
　　 結(jié)果:
　　 1、WT鼠主動脈和腸系膜阻力動脈組織均有UCP2的mRNA表達(dá),而在UCP2-/-小鼠中則未檢測到UCP2的mRNA表達(dá)。
　　 2、WT小鼠HS組的鼠尾動脈收縮壓與NS組無顯著差異,而UCP2-/-小鼠HS組的鼠尾動脈收縮壓顯著高于NS組(P＜0.01)。WT小鼠HS組的頸動脈介入平均血壓與NS組亦無顯著差異,而UCP2-/-小鼠HS

7、組的頸動脈介入平均血壓顯著高于NS組(P＜0.01)。
　　 3、WT小鼠HS組的腸系膜阻力動脈對PE誘導(dǎo)的收縮反應(yīng)顯著強(qiáng)于NS組(P＜0.01),對Ach誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)顯著弱于NS組(P＜0.01);而在UCP2-/-小鼠中,高鹽誘導(dǎo)的腸系膜阻力動脈對PE誘導(dǎo)的收縮反應(yīng)的增強(qiáng)被進(jìn)一步加強(qiáng)(P＜0.01),而對Ach誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)的減弱也被進(jìn)一步減弱(P＜0.01)。各組間血管對Ach誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)的差異在加用eNOS抑制劑L-

8、NAME后則完全消失。各組小鼠腸系膜阻力動脈對NTG誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)均沒有顯著差異。
　　 4、WT小鼠HS組的主動脈和腸系膜阻力動脈中超氧陰離子的水平顯著高于NS組(P＜0.05),而NO的水平則顯著低于NS組(P＜0.05);而在UCP2-/-小鼠中,高鹽誘導(dǎo)的主動脈和腸系膜阻力動脈中超氧陰離子產(chǎn)生的增加均被進(jìn)一步加強(qiáng)(P＜0.01),而NO的水平的降低也更加顯著(分別為P＜0.01和P＜0.05)。
　　 結(jié)論: