

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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察鐵皮石斛多糖(Polysaccharide of dendrobium candidum,PDC)對(duì)高糖環(huán)境下小鼠胰腺β細(xì)胞株Min6細(xì)胞胰島素分泌、一氧化氮(Nitrogen monoxidum, NO)產(chǎn)生和NF-κB(核因子)表達(dá)的影響,探討PDC降血糖和保護(hù)胰島β細(xì)胞的可能機(jī)制。
方法:
在高糖(35.0 mmol/L)環(huán)境下培養(yǎng)小鼠胰島β細(xì)胞瘤株Min6細(xì)胞48小時(shí)誘導(dǎo)損傷,同時(shí)用PD
2、C(100、200和400μg/mL)處理細(xì)胞48小時(shí)。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(25mmol/l)、甘露醇組、高糖組(35mmol/l)、不同劑量PDC(100、200和400μg/mL)組和高糖(35mmol/l)+不同劑量PDC(100、200和400μg/mL)組。(1)采用MTT法和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)各組細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡,并計(jì)算細(xì)胞凋亡率。(2)硝酸還原酶法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)液中NO的含量。(3)放射免疫法檢測(cè)各組細(xì)胞胰島素的分泌。(4
3、)應(yīng)用Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中iNOS及NF-κB蛋白水平的表達(dá)。
結(jié)果:
?。?)與對(duì)照組相比,高糖組Min6細(xì)胞活力降低(P<0.05),細(xì)胞凋亡率增加(P<0.05),培養(yǎng)液中胰島素水平明顯下降(P<0.05),NO值較其他組上升(P<0.05),Min6細(xì)胞中NF-κB蛋白表達(dá)及iNOS蛋白表達(dá)均增加(均P<0.05)。
?。?)與對(duì)照組相比,PDC(100、200和400μg/mL)組,
4、細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡率沒有明顯變化(均P>0.05),培養(yǎng)液中胰島素水平及NO值未明顯增加(均P>0.05),培養(yǎng)液中 NF-κB蛋白表達(dá)和 iNOS的蛋白表達(dá)也未明顯增加(均P>0.05)。
(3)與高糖組相比,高糖+PDC(100、200和400μg/mL)組Min6細(xì)胞活力增加(P<0.05),細(xì)胞凋亡率降低(P<0.05),培養(yǎng)液中胰島素水平增加(P<0.05),培養(yǎng)液中NO的水平降低(P<0.05),細(xì)胞中NF-κB蛋
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