OPN基因shRNA表達(dá)載體干擾卵巢癌細(xì)胞蛋白表達(dá).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過構(gòu)建骨橋蛋白shRNA表達(dá)載體,探索卵巢癌基因治療新途徑。
　　 方法:根據(jù)基因庫上的OPN-mRNA序列,設(shè)計(jì)并合成兩端含有酶切位點(diǎn)的64個(gè)堿基的寡核苷酸鏈。寡核苷酸鏈退火后用T4DNA連接酶連接到線性化的pSilence質(zhì)粒中,并對重組質(zhì)粒進(jìn)行酶切及序列鑒定。將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入對數(shù)生長期高轉(zhuǎn)移性人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910PM,Western-Blot法分析轉(zhuǎn)染后卵巢癌細(xì)胞的OPN蛋白表達(dá)情況。
　　

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