順鉑聯(lián)合替吉奧對胃癌MGC-803細胞株抗腫瘤作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究順鉑聯(lián)合替吉奧體外對人胃癌 MGC-803細胞株的抗腫瘤作用,并對其機制進行初步探討,為順鉑聯(lián)合替吉奧提供應用于臨床提供實驗基礎以及理論依據(jù)。
  方法:首先應用四氮唑鹽(MTT)法進行初步試驗,檢測順鉑聯(lián)合替吉奧對體外培養(yǎng)的人胃癌MGC-803細胞株的抗腫瘤作用的影響;之后再進行形態(tài)學觀察,主要方法為應用倒置顯微鏡、細胞圖片后進行HE染色以及透射電鏡對胃癌
  MGC-803進行觀察;然后進行周期分布相和細胞凋亡

2、率的檢測,其方法為采用流式細胞儀檢測兩種藥物聯(lián)合應用后胃癌MGC-803的作用結果;在各種結果測定完畢后進行機制探討,方法為利用免疫組織化學法,檢測Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9三種蛋白的表達情況,深入探討順鉑聯(lián)合替吉奧對胃癌MGC-803細胞株誘導凋亡的機制。
  結果:(1)四氮唑鹽(MTT)法結果顯示:順鉑聯(lián)合替吉奧對胃癌MGC-803細胞株具有抗增值作用,并且其抑制率與用藥劑量呈正相關,隨著藥物

3、濃度增加抑制率亦呈上升趨勢(P<0.01);(2)HE染色結果顯示:順鉑聯(lián)合替吉奧在終濃度為20μg/ml時作用于胃癌 MGC-803細胞后出現(xiàn)凋亡形態(tài)學改變,可見有部分細胞形成凋亡小體。細胞可見核固縮、核碎裂以及核溶解等凋亡表現(xiàn);(3)倒置顯微鏡結果顯示:順鉑聯(lián)合替吉奧20μg/ml作用后細胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)學變化:細胞失去原來的多角形結構,變?yōu)閳A形凋亡細胞;甚至可見部分細胞完全破碎,成為死亡細胞,在鏡下呈碎片表現(xiàn);(4)透射電鏡觀察結果

4、顯示:順鉑聯(lián)合替吉奧20μg/ml作用于胃癌 MGC-803細胞后,細胞核染色質聚集成團塊狀結構,可見染色質部分有斷裂的表現(xiàn),可有凋亡小體形成;(5)流式細胞儀檢測結果進一步表明:順鉑聯(lián)合替吉奧可以誘導胃癌MGC-803發(fā)生凋亡,細胞周期蛋白檢測結果表現(xiàn)出GO/G1期比值顯著增加(P﹤0.01),而S期和G2/M期比值下降,這說明細胞周期阻滯出現(xiàn)在GO/G1期;(6)免疫細胞化學機制探討結果表明:順鉑聯(lián)合替吉奧作用后與對照組(PBS)相

5、比較Caspase—3、Caspase-8和Caspase-9表達呈增加趨勢,結果顯著(P<0.01)。
  結論:
  1、順鉑聯(lián)合替吉奧對胃癌MGC-803細胞株具有抗增殖作用。
  2﹑由于大量凋亡小體或者凋亡細胞的出現(xiàn),可以證明順鉑聯(lián)合替吉奧對胃癌MGC-803抗增殖作用在20μg/ml時主要是導致凋亡。
  3、順鉑聯(lián)合替吉奧對胃癌MGC-803細胞株的抑制增殖和誘導凋亡,其機理依據(jù)實驗證明主要可能是抑

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