芪龍調(diào)血方治療免疫性血小板減少性紫癜療效與機(jī)制研究.pdf

1、目的:免疫性血小板減少性紫癜(immune thrombocytopenic purpura,ITP)是臨床常見出血性疾病.因其病因與發(fā)病機(jī)理尚未完全闡明,故臨床治療收效甚微.該項(xiàng)研究擬選用不加任何干預(yù)因素建立ITP病證結(jié)合動(dòng)物模型,并進(jìn)行芪龍調(diào)血方治療效應(yīng)與作用機(jī)制研究.試圖從宏觀與微觀結(jié)合方面驗(yàn)證建立ITP病證結(jié)合模型的可行性,也為芪龍調(diào)血方臨床推廣應(yīng)用及新藥研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù).方法:首先采用免疫法制造ITP模型,造模前將24只B

2、ALB/C小鼠按外周血小板計(jì)數(shù)分正常、模型兩組.模型組按100μl/20g劑量體積隔日1次腹腔注射1:4稀釋的APS,造模2周后,檢測(cè)外周血小板計(jì)數(shù)、骨髓巨核細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)分類,觀察胸腺及脾臟病理學(xué)改變,以判定疾病模型是否成功.同時(shí),動(dòng)態(tài)觀察小鼠精神狀態(tài)、行動(dòng)、大小便、毛發(fā)、反應(yīng)、姿勢(shì)、皮膚瘀斑、進(jìn)食量,飲水量,體溫,體重,游泳時(shí)間、實(shí)質(zhì)臟器是否萎縮及內(nèi)臟有無瘀血、出血等中醫(yī)證候變化,以判定病證結(jié)合模型是否可行.在確立ITP病證結(jié)合模型

3、實(shí)驗(yàn)成功后,按血小板計(jì)數(shù)將84只BALB/C小鼠隨機(jī)分為正常、模型、血康口服液、醋酸潑尼松、芪龍調(diào)血方大、中、小劑量7組,于造模一周后,分別予生理鹽水及治療藥物灌胃,每日一次,共一周.通過觀察造模小鼠外周血小板計(jì)數(shù),凝血時(shí)間、骨髓巨核細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)分類、免疫機(jī)制有關(guān)的組織器官病理學(xué)交化等客觀指標(biāo)及出血程度、中醫(yī)證候變化評(píng)價(jià)芪龍調(diào)血方治療效果.在確定療效后,我們按上述造模方法,以芪龍調(diào)血方大劑量組為治療藥物,選擇流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板膜糖蛋

4、白與T細(xì)胞亞群,采用放射免疫法檢測(cè)IL-2、6、8水平,采用TUNEL法及免疫組化法分別檢測(cè)脾及胸腺細(xì)胞凋亡指數(shù)與Fas、Bcl-2基因表達(dá),探討芪龍調(diào)血方可能的作用機(jī)制.結(jié)論:根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,該項(xiàng)研究結(jié)論如下:①在國(guó)內(nèi)首次證實(shí)了不加任何干預(yù)方法可以建立病證結(jié)合ITP動(dòng)物模型,并證實(shí)"氣虛血瘀"為ITP的重要病機(jī)特征;②芪龍調(diào)血方能有效恢復(fù)ITP小鼠的血小板計(jì)數(shù),并能促進(jìn)骨髓巨核細(xì)胞向成熟方向分化,與醋酸潑尼松療效相當(dāng);③芪龍調(diào)血方作