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文檔簡介
1、目的:(1)人腎小球系膜細胞的原代培養(yǎng).(2)探討高糖對人腎小球系膜細胞和內皮細胞的影響及在高糖環(huán)境下兩種細胞的相互作用.(3)研究茶多酚對糖尿病腎病的防治作用.方法:(1)按Mackay改良方法培養(yǎng)和鑒定人腎小球系膜細胞.(2)采用雙層共同培養(yǎng)法建立系膜細胞和內皮細胞細胞相互作用研究模型,分為空白對照組、高糖組、茶多酚干預組、茶多酚對照組,并與兩種細胞分別單獨培養(yǎng)進行比較,培養(yǎng)0、12、36小時后,用分光光度比色法、放射免疫法及RT-
2、PCR方法觀察超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、Ⅳ型膠原和轉化生長因子-β<,1>(TGF-β<,1>)的表達情況.結論:(1)培養(yǎng)的細胞為人腎小球系膜細胞.(2)建立系膜細胞與內皮細胞雙層共同培養(yǎng)模型,與普通單層單獨培養(yǎng)相比可以更好地反映糖尿病腎病時腎小球內部的病理生理過程.(3)高糖可使腎小球系膜細胞、內皮細胞SOD活性下降、MDA含量、Ⅳ型膠原分泌增加并使TGF-β<,1>mRNA表達增加.(4)在正常培養(yǎng)條件下
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