單個(gè)核細(xì)胞與骨肉瘤細(xì)胞之間相互作用的研究.pdf

1、[目的]
　　體外建立骨肉瘤HOS細(xì)胞與臍血單個(gè)核細(xì)胞共培養(yǎng)模型，觀察共培養(yǎng)微環(huán)境中炎癥因子TGF-β、IL-6、IL-10的濃度變化對骨肉瘤HOS細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響。
　　[方法]
　　1.提取臍血單個(gè)核細(xì)胞，與骨肉瘤HOS細(xì)胞共培養(yǎng)3、5、7d，共培養(yǎng)組為實(shí)驗(yàn)組，兩種細(xì)胞單純培養(yǎng)設(shè)為對照組。
　　2.應(yīng)用ELISA技術(shù)檢測各組上清液中細(xì)胞因子TGF-β、IL-6、IL-10的含量變化。
　　3.應(yīng)用t

2、ranswell小室培養(yǎng)法、MTT法檢測各組骨肉瘤HOS細(xì)胞侵襲、遷移及增殖能力等生物學(xué)性狀的變化。
　　4.應(yīng)用SPSS13.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)描述,數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，兩組間比較采用獨(dú)立樣本 t檢驗(yàn)；多組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　[結(jié)果]
　　1.在共培養(yǎng)的第1d，腫瘤細(xì)胞周圍有大量的單個(gè)核細(xì)胞聚集，腫瘤細(xì)胞狀態(tài)欠佳；隨著共培養(yǎng)時(shí)間的延

3、長，相比對照組，共培養(yǎng)組單個(gè)核細(xì)胞逐漸減少，而腫瘤細(xì)胞生長旺盛。
　　2.骨肉瘤HOS細(xì)胞能夠自身分泌較高濃度的細(xì)胞因子TGF-β，而臍血單個(gè)核細(xì)胞分泌的TGF-β的量甚少；兩種細(xì)胞共培養(yǎng)后3d，共培養(yǎng)組的TGF-β濃度明顯高于HOS組（p<0.05）；共培養(yǎng)5d，兩組相差無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；共培養(yǎng)7d，共培養(yǎng)組的TGF-β濃度明顯低于HOS組（p<0.05）。另外，正常情況下單個(gè)核細(xì)胞分泌極微量TGF-β。
　　3.共培養(yǎng)組 I

4、L-6、IL-10的濃度明顯高于同一觀察點(diǎn)的對照組（p<0.05），也高于同一時(shí)間點(diǎn)的單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)組，其中共培養(yǎng)第3天，共培養(yǎng)組與單個(gè)核細(xì)胞對照組差別有顯著性意義（p<0.01）。共培養(yǎng)7天，微環(huán)境中IL-6濃度均大于對照組。另外，骨肉瘤細(xì)胞對照組分泌極少量IL-10。
　　4.共培養(yǎng)第3d，共培養(yǎng)組骨肉瘤HOS細(xì)胞的遷移、侵襲數(shù)量減少，增殖能力明顯受抑制；共培養(yǎng)第5d，培養(yǎng)組與對照組骨肉瘤HOS細(xì)胞的遷移、侵襲及增殖能力差異無