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1、電刺激(Electrical Stimulation,ES)可以調(diào)控細(xì)胞在特定材料如組織支架材料中的行為變化,從而達(dá)到治療損傷組織的目的。神經(jīng)組織損傷后不容易修復(fù),而ES對(duì)損傷組織的修復(fù)具有良好的效果。組織工程ES的應(yīng)用,不僅要求導(dǎo)電材料的支持為后盾,還需要一個(gè)可行的電刺激模型及合適的電刺激參數(shù)。因此,設(shè)計(jì)電刺激的模型及電刺激參數(shù)的設(shè)置都是非常重要的。
本文采用化學(xué)聚合方法制備透明質(zhì)酸(HA)摻雜的聚3,4-乙撐二氧噻吩(PE
2、DOT)導(dǎo)電材料,然后物理混合聚乳酸(PLLA),制得適合細(xì)胞生長(zhǎng)且具有導(dǎo)電性與生物可降解性的復(fù)合材料。并且設(shè)計(jì)出一個(gè)可行的電刺激培養(yǎng)模型,確定了電刺激參數(shù),考察了ES和PEDOT/PLLA膜共同作用對(duì)PC12細(xì)胞的行為變化影響。四探針電導(dǎo)率儀測(cè)試顯示,當(dāng)3,4-乙撐二氧噻吩(EDOT)單體為0.01mol,HA為0.05g,過(guò)硫酸銨(APS)為0.015mol,反應(yīng)時(shí)間為24h,制備的PEDOT顆粒直徑在200-300nm范圍;當(dāng)PE
3、DOT質(zhì)量濃度30%時(shí),制備的PEDOT/PLLA薄膜的電導(dǎo)率可達(dá)2.61×10-2s/cm;雖MTT分析電刺激后的細(xì)胞生存力有一定程度的下降,但金相顯微鏡觀察表明,PEDOT/PLLA薄膜協(xié)同ES對(duì)PC12細(xì)胞的突觸伸長(zhǎng)及粘附是有利的。以上結(jié)果初步表明,PEDOT/PLLA膜和ES能促使PC12細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成和突觸的伸長(zhǎng)。對(duì)比實(shí)驗(yàn)中的電流強(qiáng)度而言,500μA電刺激對(duì)PC12細(xì)胞的分化最為明顯。這對(duì)神經(jīng)組織工程相關(guān)方面的深入研究提供
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