AQP5在手汗癥合并腋窩多汗患者腋窩汗腺的表達定位及人汗腺細胞體外模型的實驗研究.pdf

1、目的:
　　檢測多汗癥患者腋窩汗腺水通道蛋白5(aquaporin5,AQP5)的表達與定位,并通過建立人體汗腺細胞體外模型的實驗研究,探討其與多汗癥發(fā)病機制的關(guān)系。
　　方法:
　　收集手汗癥合并腋窩中重度多汗患者(實驗組)及非多汗患者(對照組)腋窩皮膚及血清標本,HE染色及透射電鏡觀察兩組間形態(tài)學差異,并電鏡下計數(shù)汗腺細胞分泌顆粒,免疫組化、熒光定量PCR及Western-blot法檢測AQP5表達。
　　酶

2、消化法培養(yǎng)兩組汗腺細胞,通過細胞免疫化學法鑒定細胞,并比較兩組細胞生長趨勢及AP5表達;Elisa法檢測兩組血清乙酰膽堿濃度,并按照測得兩組濃度配制培養(yǎng)液進行細胞培養(yǎng),通過免疫熒光法及Western-blot法檢測汗腺細胞AQP5表達。
　　結(jié)果:
　　兩組間在病理形態(tài)學及超微結(jié)構(gòu)上未見明顯差異;實驗組細胞分泌顆粒顯著高于對照組,且AQP5mRNA及蛋白表達量顯著高于對照組;培養(yǎng)的汗腺細胞抗-CK7,抗-CK19染色陽性,抗

3、-Actin染色陰性,兩組細胞生長趨勢接近;實驗組AQP5mRNA表達量高于對照組(P<0.05),而蛋白表達無明顯差異(P>0.05);
　　實驗組外周血乙酰膽堿濃度高于對照組(P<0.05);按照測得濃度配制培養(yǎng)液培養(yǎng)汗腺細胞,6h后高濃度培養(yǎng)液汗腺細胞AQP5表達強度明顯高于低濃度組(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　手汗癥合并腋窩多汗者腋窩汗腺與非多汗癥者相比在形態(tài)學上無差異,但分泌顆粒增多,AQP5mRNA及