絲素-殼聚糖共混膜與頜下腺細胞體外復合培養(yǎng)的實驗研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學位論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構的學位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關責任。論文作者簽名：量望日期：趁!監(jiān)基蘭閹中國醫(yī)科

2、大學研究生學位論文版權使用授權書本人完全了解中國醫(yī)科大學有關保護知識產權的規(guī)定，即：研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產權單位屬中國醫(yī)科大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學，且導師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學。學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內容(保密內容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文

3、作者簽名：指導教師簽名：日期：王哲五目的探討絲素殼聚糖共混膜(SilkfibroinchitosanblendSFCS)與頜下腺細胞體外復合培養(yǎng)的可行性，為進一步構建功能性的頜下腺組織提供依據。方法體外組織塊法原代培養(yǎng)3天齡SD大鼠的頜下腺細胞(RSMGcell)，免疫組織化學方法進行細胞來源鑒定，傳代。將濃度為20x104／ml的第2代頜下腺細胞懸液接種于5mmx5mmx2mm絲素殼聚糖共混膜體外復合培養(yǎng)，作為實驗組。同時將20x10

4、4／wtl的第2代頜下腺細胞懸液接種于培養(yǎng)板體外培養(yǎng)，作為對照組。分別于接種后1h、2h、4h、8h、24h，測定實驗組和對照組SD大鼠頜下腺細胞的附著率。倒置相差顯微鏡定期觀察2組SD大鼠頜下腺細胞的生長情況和形態(tài)變化，并于復合培養(yǎng)的第3、7天取材，掃描電鏡觀察頜下腺細胞的超微結構。MTT法分別檢測2組SD大鼠頜下腺細胞的增殖情況。分別取復合培養(yǎng)1天到lO天的培養(yǎng)上清液，測定淀粉酶含量，檢測2組SD大鼠頜下腺細胞的分泌功能。Hoech

5、stPI染色，檢測細胞活力。采用SPSSforwindows130統計分析軟件對結果進行兩個獨立樣本t檢驗，檢驗水準a=O05，P005認為有統計學差異。結果成功的將SD大鼠頜下腺細胞(RSMGcell)與制備出的絲素殼聚糖共混膜體外復合培養(yǎng)。并觀察到實驗組于接種lh時RSMGcell即開始附著于絲素殼聚糖共混膜上，4h時達到60％以上，8h時80％以上RSMGvell附著，24h時93％左右的RSMGcell附著。而對照組RSMGce