沙立度胺及與順鉑聯(lián)合對Hela細胞影響的研究.pdf

1、目的：宮頸癌是一種嚴重危害婦女健康的惡性腫瘤。近年來化療的地位不斷提高，而化療藥物中的順鉑是首選，但是大劑量化療藥物所帶來的嚴重的副作用及耐藥反應對化療的療效構成挑戰(zhàn)，減少化療藥物的用量及克服耐藥將成為提高進展型宮頸癌5年生存率的關鍵。因此，尋找增加化療藥物的敏感性的途徑就顯的極其重要。 本實驗采用MTT法測定沙立度胺單獨及與順鉑聯(lián)合對人宮頸癌Hela細胞體外生長的增殖抑制作用，采用流式細胞儀分析對細胞周期、凋亡的影響，旨在進一

2、步探討沙立度胺及與順鉑聯(lián)合對人宮頸癌Hela細胞株體外生長及對其凋亡、細胞周期的影響，及采用免疫細胞化學法研究沙立度胺對bcl-2蛋白的影響。為沙立度胺在宮頸癌治療中的應用以及與其它藥物聯(lián)合應用提供理論支持，為宮頸癌聯(lián)合化療開辟一條新思路。 方法： 1.研究對象：人宮頸癌Hela細胞株。 2.MTT法測定藥物對Hela細胞生長的抑制率。分為4個試驗組：(1)對照組只加培養(yǎng)液。(2)沙立度胺組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃

3、度為400mg/L、200 mg/L、100 mg/L、50 mg/L、25mg/L、12.5 mg/L、6.25 mg/L沙立度胺溶液。(3)順鉑組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃度為5mg/L、2.5mg/L、1mg/L、0.5mg/L的順鉑溶液。(4)聯(lián)合組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃度為、100 mg/L、50 mg/L、25 mg/L、12.5 mg/L、6.25 mg/L沙立度胺溶液和終濃度為2.5mg/L的順鉑溶液。每個濃度設置3個復孔，

4、48小時后測定吸光度值。試驗重復3次。 3.流式細胞儀測定藥物對細胞周期及凋亡的影響。采用100 mg/I。、50mg/L、6.25 mg/L沙立度胺，聯(lián)合組采用1mg/L的順鉑，分組同上，48小時后用流式細胞儀分析細胞周期及凋亡的影響。試驗重復4次。 4.免疫細胞化學法測定沙立度胺對抑凋亡基因bcl-2表達蛋白的影響。分為2組：(1)對照組只加入培養(yǎng)液(2)沙立度胺組加入用培養(yǎng)液稀釋的終濃度為100 mg/L、50