白藜蘆醇單獨及聯(lián)合順鉑對FRH-0201細胞的影響的實驗研究.pdf

1、目的：探訂白藜蘆醇(RES)與順鉑(DDP)聯(lián)合應(yīng)用對肝門部膽管癌細胞系FRH-0201的影響。
　　 方法：人肝門部膽管癌細胞株FRH-0201細胞復(fù)蘇后常規(guī)培養(yǎng)于含有10％小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中，用0.25％的胰酶消化傳代。以FRH-0201細胞為研究對象，設(shè)RES單獨作用組和DDP單獨作用組(藥物作用梯度為5、10、20、40、80、160、320umo1/L):聯(lián)合用藥1組(20umol/L RES+上述不同

2、濃度DDP)、聯(lián)合用藥2組（40umol/L RES+上述不同濃度DDP）；空白對照組（與以上各組同步操作，但不接種細胞）；陰性對照組（與以上各組同步操作，但用相同體積的培養(yǎng)基代替藥物）。應(yīng)用MTT比色法和集落形成實驗檢測RES、DDP對癌細胞增殖的抑制作用，利用中效原理計算出RES、DDP對癌細胞抑制的中效劑量（IC50）；光學顯微鏡觀察RES、DDP處理后癌細胞形態(tài)學變化；流式細胞術(shù)檢測RES、DDP作用后的細胞周期改變及細胞凋亡率

3、；采用SPSS1O.0統(tǒng)計軟件包進行分析，MTT實驗結(jié)果t檢驗及方差分析，流式細胞術(shù)采用x檢驗。
　　 結(jié)果：1、RES、DDP單用或聯(lián)合作用對人肝門部膽管癌細胞FRH-0201均有抑制作用，且呈劑量、時間依賴性，同樣濃度下RES對人肝門部膽管癌細胞株FRH-0201的抑制作用要強于DDP; RES、DDP聯(lián)合應(yīng)用的細胞抑制率較二者單獨作用顯著升.高(P<0.05)。RES作用于人肝門部膽管癌細胞FRH-020124、48、72

4、 h的IC50分別為55.35、32.84、28.01um01/L。2、RES、DDP單獨或聯(lián)合作用于人肝門部膽管癌細胞FRH-0201均可誘導細胞凋亡；RES、DDP聯(lián)合應(yīng)用的誘導凋亡率較二者單獨作用顯著升高(P<0.05)。3、RES單獨作用于人肝門部膽管癌細胞FRH-0201，可出現(xiàn)GO/G1期阻滯。DDP單獨作用于人肝門部膽管癌細胞FRH-0201，可出現(xiàn)S期阻滯。二者可以從不同環(huán)節(jié)抑制細胞增殖。
　　 結(jié)論：l、RES