P-選擇素靶向對比劑研制及在靜脈血栓磁共振分子成像中應用研究.pdf

1、靜脈血栓（venous thrombosis，VT）是一種嚴重危害人類生命和健康的靜脈回流障礙性疾病，發(fā)病率和死亡率均較高，目前其診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)和多種影像學檢查，由于VT 形成通常癥狀隱匿，故尚缺乏早期診斷方法。P-選擇素（P-selectin）是選擇素家族的重要黏附分子，主要表達在活化的血小板和內皮細胞表面，介導血小板、內皮細胞黏附及與白細胞的相互作用，是炎癥/血栓的重要介質和靶分子。核磁共振成像（magnetic resona

2、nce imaging，MRI）是一種完全無創(chuàng)的影像學診斷方法，近年來在分子成像應用研究方面進展顯著。基于此，本研究首先進行了P-選擇素為靶標的磁共振對比劑研制及其在靜脈血栓MR分子成像中應用的實驗研究。 本研究首先利用125I 標記研制的抗人P-選擇素lectin-EGF 功能域單克隆抗體（anti-human-P-selectin lectin-EGF domain monoclonal antibody，PsL-EGFmA

3、b），觀察了血管損傷內膜的P-選擇素表達。結果顯示，標記后125I-PsL-EGFmAb 的免疫活性不受影響，且能與血管損傷內膜上的P-選擇素特異性結合，表明P-選擇素在血管損傷、血栓形成初始即明顯表達。繼而將PsL-EGFmAb 通過大分子物質牛血清白蛋白（BSA）與含順磁性物質Gd-DTPA 連接，制備了具有P-選擇素靶特異性的磁共振對比劑(Gd-DTPA)n-BSA-PsL-EGFmAb，并利用ELISA、HPLC、ICP-AES

4、等方法對其進行了鑒定，該對比劑純度為98％以上，每分子連接70-100個Gd-DTPA，且抗體的免疫活性不受影響。本研究進一步利用(Gd-DTPA)n-BSA-PsL-EGFmAb 進行了體外MR成像。結果顯示，該對比劑可明顯增強血小板血栓及全血血栓的MR 成像信號，同時亦能增強損傷血管內膜的成像信號。在此基礎上，本研究制備了犬股靜脈血栓模型的，利用(Gd-DTPA)n-BSA-PsL-EGFmAb 進行體內MR 分子成像，表明該對比劑