P-選擇素靶向?qū)Ρ葎┭兄萍霸陟o脈血栓磁共振分子成像中應(yīng)用研究.pdf

1、靜脈血栓（venous thrombosis，VT）是一種嚴(yán)重危害人類生命和健康的靜脈回流障礙性疾病，發(fā)病率和死亡率均較高，目前其診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)和多種影像學(xué)檢查，由于VT 形成通常癥狀隱匿，故尚缺乏早期診斷方法。P-選擇素（P-selectin）是選擇素家族的重要黏附分子，主要表達(dá)在活化的血小板和內(nèi)皮細(xì)胞表面，介導(dǎo)血小板、內(nèi)皮細(xì)胞黏附及與白細(xì)胞的相互作用，是炎癥/血栓的重要介質(zhì)和靶分子。核磁共振成像（magnetic resona

2、nce imaging，MRI）是一種完全無(wú)創(chuàng)的影像學(xué)診斷方法，近年來(lái)在分子成像應(yīng)用研究方面進(jìn)展顯著?；诖?，本研究首先進(jìn)行了P-選擇素為靶標(biāo)的磁共振對(duì)比劑研制及其在靜脈血栓MR分子成像中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)研究。 本研究首先利用125I 標(biāo)記研制的抗人P-選擇素lectin-EGF 功能域單克隆抗體（anti-human-P-selectin lectin-EGF domain monoclonal antibody，PsL-EGFmA

3、b），觀察了血管損傷內(nèi)膜的P-選擇素表達(dá)。結(jié)果顯示，標(biāo)記后125I-PsL-EGFmAb 的免疫活性不受影響，且能與血管損傷內(nèi)膜上的P-選擇素特異性結(jié)合，表明P-選擇素在血管損傷、血栓形成初始即明顯表達(dá)。繼而將PsL-EGFmAb 通過(guò)大分子物質(zhì)牛血清白蛋白（BSA）與含順磁性物質(zhì)Gd-DTPA 連接，制備了具有P-選擇素靶特異性的磁共振對(duì)比劑(Gd-DTPA)n-BSA-PsL-EGFmAb，并利用ELISA、HPLC、ICP-AES

4、等方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定，該對(duì)比劑純度為98％以上，每分子連接70-100個(gè)Gd-DTPA，且抗體的免疫活性不受影響。本研究進(jìn)一步利用(Gd-DTPA)n-BSA-PsL-EGFmAb 進(jìn)行了體外MR成像。結(jié)果顯示，該對(duì)比劑可明顯增強(qiáng)血小板血栓及全血血栓的MR 成像信號(hào)，同時(shí)亦能增強(qiáng)損傷血管內(nèi)膜的成像信號(hào)。在此基礎(chǔ)上，本研究制備了犬股靜脈血栓模型的，利用(Gd-DTPA)n-BSA-PsL-EGFmAb 進(jìn)行體內(nèi)MR 分子成像，表明該對(duì)比劑