基于AdCTLA4-Ig的非清髓性方案在造血干細(xì)胞嵌合體誘導(dǎo)大鼠后肢移植免疫耐受中的應(yīng)用.pdf

1、目的：探討基于CTLA4-Ig重組腺病毒(AdCTLA4-Ig)的非清髓性方案在造血干細(xì)胞嵌合體誘導(dǎo)復(fù)合組織異體移植免疫耐受中的作用。
　　方法：以近交系Brown Norway（RT1n）大鼠為供體，Lewis（RT11）大鼠為受體。實(shí)驗(yàn)分4組：A組：受體直接給予同種異體后肢移植，移植前不進(jìn)行非清髓性預(yù)處理，移植后僅給予低劑量CsA(8mg/kg/d)腹腔注射。B組：受體先給予非清髓性預(yù)處理，首先每天給予免疫抑制劑三聯(lián)方案（腹腔

2、注射RAPA＋MMF＋MP；days－33～100），然后分3次尾靜脈注射AdCTLA4-Ig（5×109PFU/d，days－30，0，30）,而后接受3Gy（照射率0.5Gy/min）低強(qiáng)度全身照射，不給予骨髓移植，全身照射后30d進(jìn)行大鼠后肢移植（day0）。C組：受體預(yù)處理方案同B組，在低強(qiáng)度全身照射后4h內(nèi)尾靜脈注射供體骨髓細(xì)胞（100×106，day－30），骨髓移植后30d進(jìn)行大鼠后肢移植（day0）。D組：受體預(yù)處理方案

3、及骨髓移植方法同C組，但大鼠后肢移植供體為第三方動(dòng)物WF大鼠（day0）。在后肢移植后第100d各組均停止免疫抑制劑三聯(lián)方案，僅給予低劑量CsA(8mg/kg/d，days100～)，直至大鼠后肢移植物發(fā)生排斥反應(yīng)而壞死。通過外周血嵌合率檢測(cè)，GVHD檢測(cè)，后肢移植物存活情況觀察，移植物組織病理學(xué)檢查與評(píng)價(jià)及混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)對(duì)免疫耐受狀態(tài)進(jìn)行分析評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果：C組外周血嵌合率為（38.8±10.6％，day0）并長(zhǎng)期保持穩(wěn)定（

4、29.3±11.9％，day300），均未發(fā)生GVHD,停止免疫抑制劑三聯(lián)方案后移植物存活天數(shù)>200天（A組，B組、D組均發(fā)生免疫排斥，存活天數(shù)分別為8±2天，18±3天及20±2天，與C組相比較，p<0.01）。C組移植物病理學(xué)檢查顯示無毛囊炎及血管周圍炎等慢性免疫排斥現(xiàn)象，混合淋巴反應(yīng)顯示為供體特異性免疫耐受狀態(tài)。
　　結(jié)論：基于CTLA4-Ig重組腺病毒(AdCTLA4-Ig)的非清髓性骨髓移植方案可以誘導(dǎo)長(zhǎng)期穩(wěn)定的造血干