兒童骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外對T細(xì)胞和造血干細(xì)胞的作用及移植治療造血損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究兒童骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BoneMarrowMesenchymalStemCell,BMSC)在體外對T淋巴細(xì)胞和造血干細(xì)胞的作用及移植治療造血損傷的可行性。 方法：收集正常兒童骨髓單個(gè)核細(xì)胞貼壁培養(yǎng)，取第三代后的細(xì)胞，通過流式細(xì)胞儀檢測表型；將其按1.0×103、1.0×104分別與活化T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)，通過3H-TdR摻入，β液閃計(jì)數(shù)，分析其對T淋巴細(xì)胞增殖的影響；分別用1.0×103、1.0×104、1.0×105

2、個(gè)BMSC培養(yǎng)后的上清液在24孔趨化板中對T淋巴細(xì)胞和臍血CD34+細(xì)胞進(jìn)行趨化；分別用1.0×103、1.0×104BMSC作為飼養(yǎng)層，建立臍血單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)體系，觀察其對造血干/祖細(xì)胞的數(shù)量及CFU-GM、CFU-E、CFU-GEMM集落的擴(kuò)增效率；將SCID小鼠經(jīng)60Co2.5Gy照射后，建立造血損傷模型，將Hoechst33258體外標(biāo)記的BMSC按不同數(shù)量聯(lián)合臍血單個(gè)核細(xì)胞移植給造血損傷的SCID小鼠，觀察第21天小鼠存活率及