辛伐他汀對1型糖尿病大鼠的腎臟保護作用及對腎臟組織Toll樣受體4和MCP-1表達的影響.pdf

1、目的：研究辛伐他汀對1型糖尿病大鼠腎臟組織中Toll樣受體(TLR)4和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)表達的影響。探究辛伐他汀在糖尿病腎病中，發(fā)揮其腎臟保護作用的可能機理，為臨床提供實驗依據(jù)。
　　 方法：Wistar大鼠54只，體重180～220g，由山西醫(yī)科大學動物實驗中心提供，實驗大鼠為清潔級。將大鼠隨機分為三組：正常對照組(NC組)、糖尿病組（DM組）、辛伐他汀干預組（S組），每組18只。禁食12小時后，造模組大鼠單

2、次腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)55mg/kg，而NC組大鼠給予檸檬酸一檸檬酸鈉溶液55mg/kg。造模72h后，切斷尾靜脈采血測血糖，隨機血糖連續(xù)三次≥16.7mmol/L為造模成功。各組在造模成功后1周給予干預，采取灌胃的方法。S組大鼠以辛伐他汀生理鹽水混懸液10mg/kg/d干預，NC組和DM組大鼠每天以等體積的生理鹽水干預。每周稱體重。各組在干預后的第4周、8周和12周隨機選取6只大鼠稱重，斷尾靜脈采

3、血測血糖；麻醉大鼠，腔靜脈穿刺采血，分離血清測血胰島素；代謝籠收集大鼠一天的尿液，測定24h尿白蛋白排泄率。脫臼法處死大鼠，分離腎臟。取少部分腎臟組織液氮速凍后，保存于-70℃，用于實時熒光定量-PCR實驗，測定腎臟組織TLR4和MCP-1mRNA表達量。剩下的腎臟組織以10％中性甲醛固定、梯度酒精脫水、石蠟包埋，制作成石蠟切片。切片經(jīng)HE染色，在光鏡下觀察腎臟組織形態(tài)學的變化。切片通過免疫組織化學實驗測定腎臟組織中TLR4和MCP-1

4、的蛋白表達量。
　　 結(jié)果：1、三組大鼠血糖及血胰島素的比較：除NC組外，其余兩組大鼠血糖均明顯增高，血胰島素均降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2、三組大鼠24h尿白蛋白排泄率的比較：除NC組外，其余兩組大鼠的24h尿白蛋白排泄率均明顯增多(P＜0.05)；與DM組相比，用辛伐他汀治療后的24h尿白蛋白排泄率明顯減低(P＜0.05)。
　　 3、三組大鼠腎臟組織中TLR4和MCP-1蛋白表達的比較

5、（免疫組化法）：NC組腎臟組織中的TLR4和MCP-1蛋白低表達：同期與NC組相比，DM組和S組兩研究因子的蛋白表達量增加(P＜0.05)；與DM組相比，在辛伐他汀治療后兩因子的蛋白表達減少(P＜0.05)。
　　 4、12周三組大鼠腎臟組織中TLR4和MCP-1mRNA表達的比較：與NC組相比，DM組及S組TLR4和MCP-1mRNA表達增高(P＜0.05)；與DM組相比，辛伐他汀治療后TLR4和MCP-1mRNA表達減少(P

6、＜0.05)。
　　 5、糖尿病大鼠腎臟組織中TLR4、MCP-1的蛋白表達量與24h尿白蛋白排泄率均表現(xiàn)為正向相關(guān)(P＜0.05)。
　　 6、腎臟組織形態(tài)學觀察：NC組大鼠腎小球基底膜均勻一致，且無明顯增厚，腎小管及腎間質(zhì)清晰可見，鮮有炎癥細胞。DM組大鼠腎臟形態(tài)學改變較明顯：腎小球毛細血管腔塌陷、閉塞，腎小球體積增大；系膜區(qū)增寬，基膜增厚和系膜基質(zhì)增多，淋巴細胞數(shù)量增多；腎小管上皮細胞腫脹、變性，腎間質(zhì)可見大量淋巴