腫瘤靶向氟尿嘧啶樹枝狀聚合物納米粒的研究.pdf

1、癌癥是嚴(yán)重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病。在抗腫瘤藥物的研究中，將藥物靶向的輸入到腫瘤發(fā)生部位。pH敏感聚合物納米載體已經(jīng)成為了研究熱點(diǎn)。本文設(shè)計(jì)合成了pH敏感的兩親嵌段共聚物納米載體和pH敏感的樹枝狀聚合物納米載體，以5-氟尿嘧啶(5-FU)為模型藥物，制備了5-氟尿嘧啶納米粒，考察了納米粒的體內(nèi)外的性質(zhì)、規(guī)律及藥效學(xué)研究。具體研究內(nèi)容包括：
　　 1.pH敏感樹枝狀聚合物納米載體(mPEG2000-pDEA-PAMAM den

2、drimer，PDP)的合成
　　 首先，以大分子引發(fā)劑mPEG2000-Br、DEA為單體，采用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)(ATRP)合成了pH敏感的兩親嵌段共聚物(mPEG2000-pDEA,PD)，對其表面的Br進(jìn)行疊氮化結(jié)構(gòu)修飾；
　　 其次，發(fā)散法合成了第三代的聚酰胺胺(PAMAM)樹枝狀聚合物，以聚酰胺胺(PAMAM)樹枝狀聚合物為核，對其表面的氨基結(jié)構(gòu)炔基化修飾；
　　 最后，采用點(diǎn)擊化學(xué)(Click

3、chemistry)合成目標(biāo)pH敏感樹枝狀高分子聚合物：聚乙二醇單甲醚2000/聚(甲丙烯酸N，N-二乙氨基乙酯)/PAMAM樹枝狀聚合物PDP(mPEG2000-PDEA-PAMAM)。
　　 2.pH敏感的兩親嵌段共聚物(mPEG2000-pDEA,PD)
　　 pH敏感樹枝狀聚合物納米載體(mPEG2000-pDEA-PAMAM dendrimer，PDP)的理化性質(zhì)從微觀結(jié)構(gòu)，粒度，電性，Langmuir膜等方面

4、進(jìn)行了初步研究，證明了pH敏感的兩親嵌段共聚物(mPEG2000-pDEA,PD)pH敏感樹枝狀聚合物納米載體(mPEG2000-pDEA-PAMAM dendrimer，PDP)為納米級分子，粒徑都小于150nm，呈正電性，動態(tài)光散射測定證明，pH敏感的兩親嵌段共聚物(mPEG2000-pDEA,PD)pH敏感樹枝狀聚合物納米載體(mPEG2000-pDEA-PAMAM dendrimer，PDP)均有pH敏感作用。
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5、.5-氟尿嘧啶納米粒的制備及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
　　 選擇抗腫瘤藥5-FU為模型藥物，pH敏感樹枝狀聚合物納米載體(mPEG2000-pDEA-PAMAM dendriimer，PDP)為載體材料，制備納米粒，考察制備工藝，進(jìn)行了處方篩選，在不同pH條件下，以包封率和載藥量作為考察指標(biāo)，優(yōu)化了處方(包封率25.0％和載藥量98.5％)，確證了納米粒的pH敏感性。證明5-FU納米粒是將5-FU包封于PDP載體的空腔內(nèi)，形成納米級微粒；平均粒

6、徑92nm；Zeta電位為5.8mV。
　　 4.5-FU納米粒物理穩(wěn)定性
　　 冷藏放置1個月濃度幾乎沒有變化。室溫長期放置顏色發(fā)生變化。高濃度樣品重新分散后濃度沒有明顯變化。
　　 5.5-FU納米粒的體外釋放
　　 模擬體內(nèi)環(huán)境，透析法對5-FU和5-FU納米粒進(jìn)行了體外釋放實(shí)驗(yàn)，考察不同pH的釋放介質(zhì)對其產(chǎn)生的影響，結(jié)果證明5-FU原料藥在兩種釋放介質(zhì)(pH6.5，pH7.4)中的釋放基本一致。而

7、5-FU納米粒在弱酸性環(huán)境下(pH6.5)釋放很快，中性(pH7.4)釋放緩慢，具有良好的pH敏感性。
　　 6.5-FU納米粒在昆明小鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)和組織分布
　　 5-FU納米粒于正常昆明小鼠靜脈注射給藥后迅速從血液向各主要組織(肝、腎、脾)分布，分布相(t1/2α)的半衰期為2.686±2.654min，消除相的半衰期(t1/2β)為21.712±12.392min;8h在體內(nèi)已基本清除。選用H22小鼠肝癌細(xì)胞

8、株，建立了荷瘤昆明小鼠模型，5-FU納米粒于荷瘤昆明小鼠靜脈注射給藥后迅速從血液向腫瘤部位分布，分布t1/2α為4.01±3.98min，消除相的半衰期(t1/2β)為2760619.47±3783819.30min;腫瘤組織組織中分布最多，具有明顯的腫瘤靶向性。
　　 7.5-FU納米粒在荷瘤昆明小鼠體內(nèi)的初步藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
　　 建立了昆明小鼠H22肝癌模型，尾靜脈給藥，三日后連續(xù)給藥9天。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明從小鼠體重及腫瘤體

9、積評價，空白載體組PDP與陰性對照組沒有差別，證明PDP載體沒有毒性。5-FU納米粒的抑瘤率明顯好于5-FU溶液(p＜0.01)，抑瘤率達(dá)到了91％，證明了5-FU納米粒降低了5-FU的毒性，增強(qiáng)了腫瘤靶向性，提高了療效。
　　 本文合成了pH敏感兩親嵌段聚合物PD和pH敏感樹枝狀聚合物納米載體PDP，應(yīng)用pH敏感樹枝狀聚合物納米載體PDP對抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶進(jìn)行了包封，制成了具有納米級的pH敏感的樹枝狀長循環(huán)5-FU納米粒