細(xì)胞免疫功能與T淋巴細(xì)胞亞群在監(jiān)測(cè)腎移植術(shù)后感染和排斥中的臨床意義.pdf

1、目的:使用細(xì)胞免疫功能（Cylex Immuknow方法）監(jiān)測(cè)腎移植術(shù)后受者體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞內(nèi)ATP水平，探討其在腎移植術(shù)后的變化趨勢(shì)和發(fā)生排斥反應(yīng)、感染時(shí)的變化，以及其與免疫抑制劑血清藥物濃度的相關(guān)性。同時(shí)監(jiān)測(cè)腎移植術(shù)后T淋巴細(xì)胞亞群的變化，探討兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)術(shù)后免疫功能監(jiān)測(cè)以及在判斷移植術(shù)后排斥與感染上的臨床意義。
　　方法:第一部分，以49例腎移植受者為研究對(duì)象，10例健康志愿者作對(duì)照。全部受者術(shù)后22人腎功能穩(wěn)定，1

2、5人發(fā)生排斥反應(yīng)、12人發(fā)生感染。共收集標(biāo)本n=227例，其中術(shù)前標(biāo)本n=35例，穩(wěn)定點(diǎn)標(biāo)本n=163例，排斥點(diǎn)標(biāo)本n=16例，感染點(diǎn)標(biāo)本n=13例。使用Cylex Immuknow方法檢測(cè)受者外周血中刺激后CD4+T淋巴細(xì)胞內(nèi)ATP水平；采用微粒酶聯(lián)免疫法檢測(cè)Tacrolimus（FK506）以及熒光偏振免疫法和Cyclosporin A（CsA）血清藥物谷濃度。比較并分析腎移植術(shù)后Immuknow值的變化趨勢(shì)、排斥和感染時(shí)的變化情況

3、、與免疫抑制藥物血清濃度的相關(guān)性。
　　第二部分，以27例在我院行腎移植手術(shù)的受者為研究對(duì)象，分別于術(shù)前、術(shù)后7天、14天、21天、30天、3月、6月、1年，及發(fā)生感染和（或）排斥反應(yīng)時(shí)采集外周血樣本，同時(shí)檢測(cè)T細(xì)胞亞群及Immuknow值。分析腎移植受者術(shù)后發(fā)生感染和（或）排斥時(shí)兩種指標(biāo)的變化情況，進(jìn)一步分析兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)腎移植術(shù)后患者感染和排異的鑒別診斷價(jià)值。
　　結(jié)果:第一部分：（1）腎移植受者術(shù)前測(cè)得Immuknow

4、均值為267.9±121.4 ng/ml，穩(wěn)定點(diǎn)為365.6±184.8 ng/ml，感染點(diǎn)為174.5±71.69 ng/ml，排斥點(diǎn)為445.9±246.4 ng/ml，健康志愿者為277.0±92.57ng/ml，男性為291.7±113.5ng/ml，女性為247.6±12.29ng/ml。（2）感染點(diǎn) Immuknow值顯著低于正常對(duì)照組、術(shù)前點(diǎn)以及穩(wěn)定點(diǎn)值（均P<0.05），感染受者感染點(diǎn)Immuknow值顯著低于自身術(shù)前值

5、（P<0.05）。（3）排斥點(diǎn) Immuknow值顯著高于術(shù)前點(diǎn)和正常對(duì)照組數(shù)值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 P<0.05）；排斥點(diǎn)數(shù)值雖高于穩(wěn)定點(diǎn)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），排斥受者排斥點(diǎn)Immuknow值顯著高于自身術(shù)前值（P<0.05）。（4）Immuknow測(cè)得的ATP值與同期測(cè)得血清藥物谷濃度沒(méi)有相關(guān)性（均P>0.05）。（5）從腎移植后穩(wěn)定點(diǎn)Immuknow值的變化趨勢(shì)來(lái)看，腎移植術(shù)后3周、1月、2月的Immuknow值

6、均明顯高于術(shù)前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），說(shuō)明腎移植受者術(shù)后短期內(nèi)免疫功能處于較高的狀態(tài)且不穩(wěn)定，需要加強(qiáng)受著免疫功能監(jiān)測(cè)。
　　第二部分：（1）27例受者中收集術(shù)前點(diǎn)標(biāo)本27例、穩(wěn)定點(diǎn)標(biāo)本96例，對(duì)同一受者術(shù)前點(diǎn)數(shù)值分別與術(shù)后7d、14d、21d，隨訪1月、3月、6月、1年的平均T淋巴亞群結(jié)果進(jìn)行配對(duì)設(shè)計(jì) t檢驗(yàn)。結(jié)果顯示 CD3+、CD8+、CD69+T淋巴細(xì)胞百分比以及CD4+/CD8+比值在移植后穩(wěn)定點(diǎn)在術(shù)前與術(shù)

7、后7d、14d、21d，隨訪1月、3月、6月、1年之間的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05）；CD4+T淋巴細(xì)胞百分比在術(shù)后2周及1月明顯高于術(shù)前（均P<0.05）；CD25+淋巴細(xì)胞百分比在術(shù)1周以及2周明顯高于術(shù)前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）；CD4+CD25+CD127lowT淋巴細(xì)胞百分比在術(shù)后1月明顯高于術(shù)前（P=0.014）；CD4+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)在術(shù)后2周、3周和1月高于術(shù)前差異顯著（均P<0.05）；CD25

8、+淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)在術(shù)后1周、2周和3周，明顯高于術(shù)前差異顯著（均P<0.05）；CD4+CD25+CD127lowT淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)在術(shù)后1周、2周、3周、1月和3月明顯高于術(shù)前，差異顯著（均P<0.05）。（2）收集排斥點(diǎn)標(biāo)本7組，排斥點(diǎn)CD69+百分比及絕對(duì)計(jì)數(shù)顯高于穩(wěn)定點(diǎn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；排斥點(diǎn)CD4+CD25+CD127low百分比及絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯低于穩(wěn)定點(diǎn)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；排斥受者排斥點(diǎn)測(cè)

9、得值與自身術(shù)前的比較顯示排斥點(diǎn)僅有CD25+計(jì)數(shù)與CD69+計(jì)數(shù)明顯高于術(shù)前，CD4+CD25+CD127low絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯低于術(shù)前，差異顯著（均P<0.05）。（3）收集感染點(diǎn)標(biāo)本9組，感染點(diǎn) CD4+T淋巴細(xì)胞百分比以及其絕對(duì)計(jì)數(shù)低于穩(wěn)定點(diǎn)，CD25+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)、CD69+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)低于穩(wěn)定點(diǎn)數(shù)值，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），感染受者感染點(diǎn)測(cè)得值與自身術(shù)前值比較顯示感染點(diǎn)CD4+計(jì)數(shù)明顯低于術(shù)前，差異顯著（P

10、<0.05）。（4）Immuknow測(cè)得的 ATP值與同期測(cè)得的 CD4+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)呈正相關(guān)（r=0.44，P<0.01）。
　　結(jié)論:（1）使用Immuknow方法監(jiān)測(cè)受者的CD4+T細(xì)胞免疫狀態(tài)，能彌補(bǔ)藥物濃度監(jiān)測(cè)的不足，提前預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)及感染的發(fā)生，指導(dǎo)臨床調(diào)整免疫抑制劑的應(yīng)用；（2） CD4+、CD25+、CD69+T淋巴細(xì)胞在排斥反應(yīng)以及感染的判斷方面存在一定意義；受者體內(nèi)Treg細(xì)胞水平能夠預(yù)判排斥反應(yīng)發(fā)生。（