對碳青霉烯類敏感性降低和不敏感鮑曼不動桿菌耐藥基因與分子流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、目的：⑴檢測15種抗不動桿菌藥物對碳青霉烯類敏感性降低鮑曼不動桿菌(CDSAB)和對碳青霉烯類不敏感鮑曼不動桿菌(CNSAB)的體外抗菌活性，為臨床治療該類菌感染提供依據(jù)。⑵采用多重聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(multiplex PCR)檢測234株臨床分離的耐藥鮑曼不動桿菌攜帶OXA型碳青霉烯酶耐藥基因的情況，探討其介導(dǎo)鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類耐藥的分子機制。⑶采用脈沖場凝膠電泳技術(shù)(PFGE)對234株臨床分離的耐藥鮑曼不動桿菌進(jìn)行克隆株分析

2、，闡述其耐藥株的分子流行機制，為臨床有效防控提供參考依據(jù)。
　　 方法：①采用瓊脂稀釋法檢測15種抗不動桿菌藥物對56株CDSAB和178株CNSAB的最低抑菌濃度(MIC)。②采用multiplex PCR技術(shù)檢測OXA型碳青霉烯酶耐藥基因，并對其進(jìn)行基因測序分型。③采用限制性內(nèi)切酶ApaI酶切234株CDSAB和CNSAB的染色體，PFGE對其進(jìn)行克隆株的檢測分析。
　　 結(jié)果：⑴2003年至2007年，CNSAB/

3、CDSAB分離菌株數(shù)比呈逐年上升趨勢;2009年CNSAB異常增多，高達(dá)109株，占全部CNSAB的61.2％(109/178)。多粘菌素B對CDSAB和CNSAB的體外抗菌活性最高，敏感率均為100％;其次為替加環(huán)素和米諾環(huán)素，約80％的CDSAB和約95％的CNSAB對二者敏感或中介。⑵本組234株鮑曼不動桿菌均攜帶有blaOXA-51-like基因。其中119株檢出blaOXA-23-like基因，占50.85％;105株檢出bl

4、aOXA-58-like基因，占44.87％;1株檢出blaOXA-24-like基因;4株檢出blaISAbal-OXA-51基因。OXA-58型主要集中在2003年～2004年，余年份都有檢出。OXA-23型在2005年首次發(fā)現(xiàn)，2009年檢出101株，占84.87％(101/119)。⑶本組234株鮑曼不動桿菌共發(fā)現(xiàn)13個克隆，其中A、G、H克隆占全部菌株的91.9％。A克隆菌100株占42.7％(100/234)，2003年～2

5、009年均有檢出，主要分布于ICU（63株）等科室，對第三代頭孢菌素等耐藥率較高，對碳青霉烯類和舒巴坦耐藥率較低;G克隆菌96株占41.0％(96/234)，僅在2009年檢出，主要分布于ICU（43株）、呼吸科（27株）等科室，對碳青霉烯類、酶抑制劑復(fù)合制劑等耐藥率較高。H克隆菌在2007年發(fā)現(xiàn)，共檢出19株占8.1％(19/234)。
　　 結(jié)論：①本組2002年至2009年臨床分離的鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類耐藥率呈逐年升高

6、趨勢。多粘菌素B、替加環(huán)素和米諾環(huán)素對CDSAB和CNSAB具有較強的體外抗菌活性。②本組234株鮑曼不動桿菌主要攜帶blaOXA-58-like基因和blaOXA-23-like基因，產(chǎn)OXA-58型酶菌株是我院臨床長期存在的流行株，產(chǎn)OXA-23型酶菌株從2005年開始出現(xiàn)，2009年檢出率最高。③A克隆菌是我院2003年以來的流行克隆株;G克隆菌僅出現(xiàn)在2009年，在ICU等10個科室均有發(fā)現(xiàn)，對碳青霉烯類耐藥，是造成2009年耐