腺苷A1受體基因敲除小鼠戊四氮致癇后大腦皮層蛋白組學(xué)的研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察腺苷A1受體基因敲除小鼠在戊四氮致癇后大腦皮層蛋白質(zhì)的變化，探討腺苷A1受體的抗癲癇和腦保護(hù)作用機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)首先采用PCR技術(shù)鑒定腺苷A1受體基因敲除小鼠與野生型小鼠，點(diǎn)燃組應(yīng)用戊四氮（30mg/kg）腹腔注射制作癲癇模型，腺苷A1受體基因敲除小鼠和野生型小鼠均設(shè)立對(duì)照組，對(duì)照組小鼠采用腹腔注射等量生理鹽水，癲癇模型點(diǎn)燃成功后24h、1m斷頭分離大腦皮層，提取總蛋白，利用蛋白組學(xué)雙向電泳（two-d

2、imensional electrophoresis,2-DE）檢測(cè)癲癇發(fā)作后大腦皮層內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)的變化，運(yùn)用2-DE圖像掃描系統(tǒng)掃描電泳凝膠，使用Image Master 2Dplatinum5.0圖像分析軟件對(duì)2-DE圖像進(jìn)行組內(nèi)、組間比較，表達(dá)差異大于兩倍及以上者為具有意義的差異點(diǎn)，選取點(diǎn)燃組其中部分差異點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析。
　　 研究結(jié)果：
　　 1.點(diǎn)燃組癲癇模型點(diǎn)燃成功后24h，1m，分別與對(duì)照組小鼠相比，大腦

3、皮層內(nèi)多種蛋白質(zhì)表達(dá)具有顯著性差異。
　　 2.腺苷A1受體基因敲除小鼠與野生型小鼠相比較，對(duì)照組兩者之間大腦皮層內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)無顯著性差異，點(diǎn)燃組兩者之間多種蛋白質(zhì)表達(dá)具有顯著性差異。
　　 3.癲癇模型點(diǎn)燃成功后腺苷A1受體基因敲除小鼠與野生型小鼠相比，大腦皮層內(nèi)表達(dá)下調(diào)或無表達(dá)的蛋白為谷氨酰胺合成酶、醛縮酶A及甘氨酸受體；表達(dá)上調(diào)的蛋白為蛋白激酶C及3-磷酸甘油醛脫氫酶。
　　 結(jié)論：腺苷A1受體可能通過