食管鱗癌及癌前病變Claudin3、4的表達及臨床病理意義.pdf

1、背景和目的:
　　在全球范圍內(nèi)食管癌為常見的腫瘤,亞洲為食管癌高發(fā)區(qū)域。食管惡性腫瘤可分為兩種截然不同的病理特征,即鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和腺癌。全球大部分的食管癌是鱗癌。鱗狀上皮異型增生(esophageal squamous dysplasia,ESD)是食管鱗癌的重要癌前病變,食管鱗癌的發(fā)生經(jīng)歷了由正常食管鱗狀上皮→食管炎→食管異型增生→食管鱗癌系列演變過程。盡管食管癌的治療技術(shù)

2、有很大進展,但由于檢出的患者多為中晚期,治療效果不佳,因此食管癌大部分病人預后較差,術(shù)后五年存活率較低。復發(fā)和轉(zhuǎn)移依然是影響食管鱗癌預后的兩大原因,因此探究食管鱗癌發(fā)生和發(fā)展的分子標記對食管癌的預防以及治療有著重要的含義。
　　緊密連接(Tight junctions,Tjs)連同粘附連接和橋粒,形成上皮和內(nèi)皮細胞的頂端連接復合體。緊密連接是細胞必不可少的密封口,其可維持組織內(nèi)的滲透壓。同時緊密連接可形成柵欄,防止膜蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的

3、橫向擴散,保持頂部和基底細胞之間的差異性。最后,緊密連接也可能參與細胞增殖,分化和其他功能。癌組織常常表現(xiàn)為粘附性消失、TJ的破壞、正常分化的消失和細胞具有侵襲性。
　　緊密連接主要由三種膜蛋白組成,即粘附分子、occludin和claudins。Claudins是緊密連接的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵分子這一觀點已被廣泛認可。迄今為止,已經(jīng)有24種claudins蛋白被克隆,它們的表達常常呈組織特異性。在不同的內(nèi)皮和上皮組織中不同 clau

4、dins的表達具有多樣化的的特性。然而值得注意的是 claudins的表達是具有可塑性的,在不同的內(nèi)環(huán)境中claudin的表達可發(fā)生改變。研究表明,claudins的異常表達與許多人類腫瘤的發(fā)生發(fā)展緊密關(guān)聯(lián)。Claudin異常表達可使組織滲透屏障遭到損壞,細胞極性完全消失,細胞與細胞間的粘附力減小,導致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。同時研究還發(fā)現(xiàn) claudin的表達異常與腫瘤的轉(zhuǎn)移和預后不良有關(guān)。目前有關(guān)食管鱗癌中claudins的表達情況及其與

5、食管鱗癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究較少,claudins在食管鱗癌中的表達與食管鱗癌患者預后的關(guān)系亦需進一步研究。因此我們檢測了 claudin3和claudin4在食管鱗癌、食管鱗狀上皮異型增生及食管炎組織中的表達,并探討兩者表達狀態(tài)與食管鱗癌的臨床病理特點及患者預后的關(guān)系。
　　方法:
　　1.15例正常食管上皮,20例食管炎組織,20例異型增生標本(重度異型增生8例,中度6例,輕度6例)均在內(nèi)鏡下取材,取材后立刻于中性福爾馬林

6、液中固定,石蠟包埋,切片為厚約4μm的連續(xù)切片,然后進行HE染色,進行組織病理學診斷。另收集在西南醫(yī)院病理科存檔,有著完整的病理和臨床資料的食管鱗癌及癌旁手術(shù)切除標本93例,制作成組織芯片。
　　2.免疫組化Envision法檢測15例正常食管上皮、20例食管炎、20例食管異型增生和93例食管鱗癌組織claudin3和claudin4的表達。
　　3.卡方檢驗(X2 test)統(tǒng)計學方法分析食管鱗癌、食管鱗狀上皮異型增生、食

7、管炎和正常食管上皮不同組之間 claudin3和 claudin4的表達差異,并分析 claudin3和claudin4的表達與食管癌臨床病理特征的關(guān)系。Kappa檢驗和 McNemanr檢驗分析claudin3、claudin4表達的關(guān)系。Kaplan-Meier法分析總體生存率,Log-rank法用于比較不同組間的生存率。
　　結(jié)果:
　　1. Claudin3蛋白主要定位在細胞膜,胞核及胞質(zhì)亦有少量表達。Claudin

8、3在食管鱗癌、異型增生、食管炎及正常食管上皮中的表達率分別為43.0％(40/93)、30%(6/20)、20%(4/20)、6.7%(1/15),正常食管上皮表達陽性率最低,癌組織表達陽性率最高,有顯著性差異(P<0.05),食管鱗癌陽性率顯著高于正常食管組織(P<0.05),而食管炎和異型增生組表達的陽性率并無顯著性差異(P>0.05)。
　　2. Claudin4蛋白主要定位在細胞膜,胞核及胞質(zhì)少有表達。Claudin4在食

9、管鱗癌組織、異型增生組織、食管炎和正常食管上皮組織中的表達率分別為45.2%(42/93)、40%(8/20)、35%(7/20)、33.3%(5/15),各組間無顯著差異性(P>0.05)。
　　3. claudin3和claudin4的表達與患者的病理分級、浸潤深度、年齡、性別及腫瘤大小無顯著相關(guān)性(P>0.05),但無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者claudin3和claudin4表達的陽性率顯著高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者高(P<0.05),且生存組

10、的陽性率較死亡組高(P<0.05)。
　　4. Claudin3和 claudin4在食管鱗癌表達陽性率無顯著差異(P>0.05,McNemar檢驗),且兩者表達存在顯著相關(guān)性(P=0.004,χ2=8.520,K=0.302)
　　5. Kaplan-Meier生存分析發(fā)現(xiàn),與claudin3和claudin4表達陽性組相比,claudin3和claudin4表達陰性組患者的術(shù)后生存率顯著降低(P<0.05)。
　　

11、結(jié)論:
　　本實驗研究發(fā)現(xiàn),從正常食管上皮到癌組織claudin3表達陽性率逐漸升高,雖然食管炎和異型增生的表達并無顯著性差異,但食管鱗癌陽性率顯著高于正常食管組織,提示claudin3可能與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。Claudin4在食管鱗癌組織、異型增生組織、食管炎和正常食管上皮組織中的表達并無差異,提示其可能與食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展無關(guān)。claudin3、claudin4表達降低與食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預后不良有關(guān),可能成為評估患者