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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討重組腺病毒Ad-IL-12感染人外周血淋巴細(xì)胞后對(duì)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3增殖、周期和凋亡的影響。
方法:用重組人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外周血淋巴細(xì)胞,感染48 h后與人卵巢癌細(xì)胞SKOV3共培養(yǎng)(SKOV3/Ad-IL-12),同時(shí)設(shè)未感染組(SKOV3)和Ad-GFP空載感染組(SKOV3/Ad-GFP)作為對(duì)照。RT-PCR檢測(cè)IL-12雙亞基P35和P40的mRNA表達(dá),ELISA檢測(cè)細(xì)胞培
2、養(yǎng)上清中IL-12 P70蛋白的分泌,CCK8法檢測(cè)SKOV3增殖情況,流式細(xì)胞術(shù)分析共培養(yǎng)后的卵巢癌細(xì)胞周期和凋亡水平,進(jìn)一步以RT-PCR和Western blot檢測(cè)抗凋亡蛋白BCL-2、Survivin的表達(dá)。
結(jié)果:重組腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外周血淋巴細(xì)胞,分泌較高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴細(xì)胞過表達(dá)IL-12可抑制SKOV3細(xì)胞的增殖;與未感染組和空載組相比,SKOV3/Ad-IL-12組G1期
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