HYAL基因沉默對卵巢癌SKOV3細胞增殖和侵襲的影響.pdf

1、目的：觀察RNA干擾HYAL基因?qū)β殉舶㏒KOV3細胞增殖和侵襲能力的影響。 方法：采用RT-PCR方法研究卵巢癌SKOV3細胞中HYAL1、HYAL2、HYAL3基因表達情況，并針對表達量高的HYAL的基因設計合成siRNA，并篩選一對有效的siRNA。轉(zhuǎn)染SKOV3細胞后，RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后HYAL基因的mRNA表達情況，MTT法檢測轉(zhuǎn)染siRNA后SKOV3細胞增殖的變化、流式細胞儀檢測轉(zhuǎn)染siRNA后SKOV3細胞的

2、細胞周期變化。并構建體外侵襲模型，觀察siRNA-HYAL對SKOV3細胞侵襲能力的影響。 結果：卵巢癌SKOV3細胞HYAL2/β-actin OD比值(0.64±0.0177)明顯高于HYAL1/β-actin OD比值(0.3478±0.0322)和HYAL3/β-actinOD比值(0.4036±0.0246)，其P<0.05，轉(zhuǎn)染siRNA-HYAL2后HYAL2基因mRNA表達水平明顯降低。MTT顯示轉(zhuǎn)染siRNA-

3、HYAL2后卵巢癌SKOV3細胞平均A值(0.6706±0.0197)比陰性對照組1平均A值(0.8878±0.0225)和陰性對照組2平均A值(0.8884±0.0345)降低(P<0.05)，流式細胞儀顯示轉(zhuǎn)染siRNA-HYAL2組的S期細胞百分比(18.7140±0.6129)較陰性對照組1(27.8820±0.7524)、陰性對照組2(28.7140±0.9711)及空白對照組(28.8640±0.8206)降低(P<0.05

4、)，實驗組G<,0>-G<,1>期細胞百分比(77.2580±1.2968)較陰性對照組1(67.4800±1.1836)、陰性對照組2(67.3360±1.0788)及空白對照組(66.2040±1.0846)升高(P<0.05)。而陰性對照組1、陰性對照組2及空白對照組之間G<,0>-G<,1>期和S期之間無明顯差異(P>0.05)。轉(zhuǎn)染siRNA-HYAL2后平均穿膜細胞數(shù)(42.6000±7.1624)比陰性對照組1平均值(14

5、5.4000±17.8410)、陰性對照組2平均值(143.8000±15.6109)和空白對照組平均值(146.2000±16.8434)少(P<0.05)；而陰性對照組1平均值、陰性對照組2平均值和空白對照組平均值之間的差異無顯著性(P>0.05)。 結論：卵巢癌SKOV3細胞主要表達HYAL2，siRNA-HYAL2能特異性抑制HYAL2的mRNA表達水平。RNA干擾HYAL基因?qū)β殉舶㏒KOV3增殖和侵襲能力有抑制作用，