通心絡(luò)膠囊對(duì)易損斑塊穩(wěn)定作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景；冠心病無論在發(fā)達(dá)國(guó)家，或者在發(fā)展中國(guó)家均是最常見的致殘甚至致死的主要原因之一。所以在世界范圍內(nèi)，有效預(yù)防冠心病策略變得極為迫切。急性冠脈綜合征為冠心病急癥，其范圍包括不穩(wěn)定型心絞痛、急性心肌梗死、心性猝死等一系列臨床病理生理狀態(tài)。在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的基礎(chǔ)上斑塊破裂和血栓形成是大多數(shù)冠心病急性發(fā)病，特別是急性冠脈綜合征的主要病理生理基礎(chǔ)。大量病理，影像及臨床研究表明，60％-70％的急性冠脈綜合征是由輕至中度狹窄AS斑塊破裂繼發(fā)冠狀

2、動(dòng)脈血栓引起的，急性冠脈綜合癥(ACS)的發(fā)生與斑塊的穩(wěn)定性和繼發(fā)血栓形成密切相關(guān)。致斑塊不穩(wěn)定的因素很多，如斑塊中脂核的大小、斑塊中纖維帽厚度及其膠原含量等等。從某種意義上說，影響斑塊穩(wěn)定性的因素勢(shì)必也是影響冠心病臨床表現(xiàn)及預(yù)后的因素。冠狀動(dòng)脈血運(yùn)重建雖可減輕冠脈狹窄程度，但與藥物治療相比，長(zhǎng)期隨訪未明顯減少急性冠脈事件發(fā)生率，主要原因是斑塊的不穩(wěn)定問題尚未解決，穩(wěn)定斑塊著重于改變易損斑塊的內(nèi)在特性。與防治血栓和血管化相比，穩(wěn)定斑塊更

3、具有臨床重要性。因此，認(rèn)識(shí)易損斑塊的內(nèi)在特性、破裂機(jī)制、識(shí)別方法，預(yù)測(cè)斑塊破裂及尋找斑塊穩(wěn)定劑對(duì)臨床預(yù)防急性冠脈事件的發(fā)生具有非常重要意義。 目的；(1)建立動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的動(dòng)物模型(2)通過血管內(nèi)超聲觀察通心絡(luò)膠囊對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化血管形態(tài)學(xué)及斑塊病理過程的影響(3)并采用免疫組織化學(xué)方法，測(cè)定各組實(shí)驗(yàn)兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)，基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物1(TIMP-1)信號(hào)強(qiáng)度，觀察通心絡(luò)膠囊對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊MMP

4、-1，TIMP-1表達(dá)的影響(4)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)患者血清中高敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)，可溶性P選擇素(P-Selectin)，MMP-1等炎性指標(biāo)的水平，觀察通心絡(luò)膠囊對(duì)血清炎性指標(biāo)的影響(5)觀察通心絡(luò)膠囊對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊血漿纖維蛋白原(Fib)水平的影響(6)探討通心絡(luò)膠囊對(duì)高膽固醇飼喂的兔動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的作用及通心絡(luò)膠囊穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的可能機(jī)制。 方法；46只新西蘭純種雄兔采用PTCA

5、充盈球囊牽拉法損傷腹主動(dòng)脈內(nèi)皮，之后高膽固醇飼料(1％膽固醇，每只120～140g.d-1)喂養(yǎng)8周。于8周末，隨機(jī)抽取16只兔為驗(yàn)證組，行血管內(nèi)超聲證明動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，分別給予中國(guó)斑點(diǎn)蝰蛇毒(ChineseRussell'svipervenom，CRVV)以及組胺進(jìn)行藥物觸發(fā)，以促使斑塊發(fā)生實(shí)驗(yàn)性破裂。在藥物觸發(fā)后，驗(yàn)證組中所有出現(xiàn)斑塊破裂的家兔歸入斑塊破裂組，所有無斑塊破裂的家兔歸入斑塊未破裂組，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)兔血清中高敏C反應(yīng)蛋白

6、(hsCRP)，MMP-1，TIMP-1，可溶性P選擇素等炎性指標(biāo)的水平。剩余家兔為干預(yù)組，隨機(jī)抽簽分組，高脂飲食組(10只)繼續(xù)高脂飲食，普通飲食組(10只)給予停用高脂飲食改為普通飲食，通心絡(luò)組(10只)給予通心絡(luò)膠囊，用藥時(shí)間12周，服藥期間繼給予高膽固醇飲食，12周時(shí)進(jìn)行藥物觸發(fā)，以造成斑塊破裂。各組兔分別于實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死動(dòng)物前進(jìn)行血液檢測(cè)，檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固

7、醇(LDL-C)、纖維蛋白原(Fib)的水平。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)患者血清中高敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)，MMP-1，可溶性P選擇素等炎性指標(biāo)的水平。應(yīng)用血管內(nèi)超聲檢查，觀察實(shí)驗(yàn)兔動(dòng)脈粥樣硬化血管形態(tài)學(xué)改變及藥物對(duì)斑塊病理過程的影響，并采用免疫組織化學(xué)方法，測(cè)定各組MMP-1，TIMP-1信號(hào)強(qiáng)度。 結(jié)果；1斑塊破裂組與未破裂組比較：血清ELISA檢測(cè)hs-CRP，MCP-1，IL-8，IL-18，基質(zhì)金屬蛋白酶

8、1，P-選擇素明顯升高，有顯著性差異(P＜0.05)，而IL-10，TIMP-1，MMP-3，MMP-12比較雖前兩者未破裂斑塊組增加，后兩者降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05).2藥物干預(yù)三月后：(1)通心絡(luò)組，普通飲食組血清中hsCRP、P選擇素，MMP-1水平明顯低于高脂飲食組，通心絡(luò)組與高脂飲食組，普通飲食組與高脂飲食組比較，差異具有顯著意義，(P均＜0.05)。(2)通心絡(luò)組與高脂飲食組，普通飲食組與高脂飲食組相比較，總膽固醇

9、(TC)、低密度脂蛋白降低(LDL-C)，差異有顯著性(P＜005)，而以普通飲食組降低明顯。(3)免疫組織化學(xué)結(jié)果，通心絡(luò)組與高脂飲食組，普通飲食組比較，MMP-1的陽性細(xì)胞數(shù)明顯降低，均具有顯著性差異(P＜0.05).普通飲食組與高脂飲食組比較，差異無顯著性。TIMP-1的陽性細(xì)胞數(shù)與高脂飲食組，普通飲食組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)與高脂飲食組，普通飲食組相比較，通心絡(luò)膠囊塊具有較小的血管外彈力膜面積(EEMA,)，斑塊面積(PA)

10、，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或P＜0.01)。管腔面積狹窄率(LAS％)明顯小于高脂飲食組，差異具有顯著意義(P＜0.05)，而與普通飲食組比較，差異無顯著性。 結(jié)論；(1)通心絡(luò)膠囊可通過選擇性的改變粥樣斑塊中MMPs和TIMPs表達(dá)，減少基質(zhì)分解破壞，增加局部斑塊的穩(wěn)定性，發(fā)揮一定程度的穩(wěn)定粥樣斑塊、延緩動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的作用。(2)通心絡(luò)膠囊可以降低P選擇素,hsCRP，MMP-1等血漿炎癥因子的水平，抑制單核細(xì)胞和T淋巴

11、細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附作用減輕動(dòng)脈粥樣硬化斑塊纖維帽周圍的炎癥環(huán)境，加固斑塊的纖維帽，有利于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定。(3)通心絡(luò)膠囊干預(yù)可以降低纖維蛋白原水平，通過阻抑血小板活化和調(diào)節(jié)纖溶系統(tǒng)活性阻斷AS病理進(jìn)程。(4)與單純調(diào)脂治療相比，通心絡(luò)膠囊對(duì)易損斑塊的穩(wěn)定作用更有優(yōu)勢(shì)。主要表現(xiàn)在抑制斑塊炎癥反應(yīng)及對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化血管形態(tài)學(xué)及斑塊病理過程的影響上。(5)IVUS應(yīng)用于已建立的動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊動(dòng)物模型上，能夠準(zhǔn)確的識(shí)別動(dòng)脈粥樣