AQP1、AQP3在人不同退變級(jí)別椎間盤(pán)髓核細(xì)胞中表達(dá)的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　 椎間盤(pán)退變(Intervertebral disc degeneration，IVDD)是引起腰腿痛的一個(gè)重要原因，但目前為止，椎間盤(pán)退變的生理、病理機(jī)制仍未明確。髓核組織的退變是椎間盤(pán)退變的中心環(huán)節(jié)，本研究擬通過(guò)免疫組化方法和Real time-PCR技術(shù)對(duì)正常組和退變組的髓核組織中水通道蛋白1(Aquaporin1，AQPl)和水通道蛋白3(Aquaporin3，AQP3)表達(dá)水平的比較研究，探討水通道蛋白1和

2、水通道蛋白3在椎間盤(pán)髓核組織中的作用，了解水通道蛋白在椎間盤(pán)髓核的生理及病理意義，探討一種新的椎間盤(pán)退變的病理生理機(jī)制，進(jìn)而為椎間盤(pán)退變的防治提供一種新的思路和方向。
　　 方法：
　　 根據(jù)Pfirrmann分級(jí)方法將椎間盤(pán)髓核組織標(biāo)本分為5個(gè)等級(jí)，1-5級(jí)分別對(duì)應(yīng)A、B、C、D、E五個(gè)組別。將標(biāo)本進(jìn)行固定、洗滌、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片，然后運(yùn)用HE染色技術(shù)觀察髓核組織退變的病理表現(xiàn)。隨后運(yùn)用免疫組織化學(xué)和Rea

3、l time-PCR技術(shù)觀察AQP1及AQP3在椎間盤(pán)髓核的表達(dá)水平，分別測(cè)量其免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度(MOD)和mRNA表達(dá)含量。對(duì)得出的數(shù)據(jù)運(yùn)用17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.HE染色觀察：正常組：髓核組織結(jié)構(gòu)疏松，基質(zhì)成分完整，髓核細(xì)胞多，膠原纖維走行清楚，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)完整。退變組：髓核組織皺縮，基質(zhì)成分減少，膠原纖維增生粗大，走行紊亂，髓核細(xì)胞少，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不完整。
　　

4、2.免疫組化分析：退變組AQP1及AQP3的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)較正常組明顯減弱，其MOD值隨椎間盤(pán)退變程度加重呈進(jìn)行性下降。對(duì)各組間的MOD值行單因素方差分析，AQP1：A組與C、D、E組比較，B組與D、E組比較，C組與E組比較，D組與E組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；其余各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。AQP3的MOD值在各個(gè)組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。對(duì)AQP1、AQP3的MOD值和Pfirrm

5、ann分級(jí)、年齡之間進(jìn)行Pearson積矩線性相關(guān)分析：AQP1與Pfirrmann分級(jí)之間呈顯著反相關(guān)(r=-0.862，P＜0.01);AQP3與Pfirrmann分級(jí)之間呈顯著反相關(guān)(r=-0.944，P＜0.01); AQP1與年齡之間呈顯著反相關(guān)(r=-0.794，P＜0.01)，AQP3與年齡之間呈顯著反相關(guān)(r=0.881，P＜0.01)。
　　 3.Real time-PCR分析：退變組髓核組織的Ⅱ型膠原mRNA

6、表達(dá)較正常組明顯減少，AQP1及AQP3的mRNA表達(dá)隨椎間盤(pán)退變程度加重呈進(jìn)行性下降。對(duì)各組間AQP1及AQP3的mRNA表達(dá)行單因素方差分析，AQP1：A組與C、D、E組比較，B組與D、E組，C組與E組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；其余各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。AQP3：A組與D、E組比較，B組與D、E組，C組與E組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；其余各組組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。