零流電位法研究生物分子間相互作用及藥物含量的測定.pdf

1、從分子水平上闡述物質間的相互作用，特別是金屬離子、藥物分子等與生物分子間的特異性結合，是當前藥物化學、生命科學、臨床醫(yī)學等許多領域的熱門研究課題。伏安法是常用的研究分子間作用的電化學手段之一，但是當物質本身沒有電化學活性或是相互作用的兩物質氧化還原峰發(fā)生重疊時，伏安法的應用受到限制。零流電位法是通過監(jiān)測作用過程中界面電位的變化情況來研究兩種物質的相互作用，故可有效避免這兩方面因素的約束。
　　本論文以零流電位法作為研究方法，分別考

2、察了多價態(tài)金屬離子與氨基酸相互作用的熱力學；生物大分子蛋白質與藥物小分子相互作用的動力學與熱力學；藥物小分子含量測定的應用。論文具體包括以下內容：
　　（1）用零流電位法分別研究了 Cu2+和Cu+與甘氨酸（Glycine，Gly）的配位反應，基于銅的電化學活性，在銅絲表面施加不同電位范圍的線性掃描電位Eapp，從而選擇性地電生出Cun+（Cu2+或Cu+），并與溶液中的Gly發(fā)生配位反應，引起Cu/Cun+/Gly界面電位的變化

3、。通過記錄相應 I-Eapp曲線的移動以及零流電位值（Zero current potential,Ezcp）隨Gly濃度的變化，推導了Ezcp~logc(Gly)之間的關系，實現(xiàn)了Cu2+-Gly和Cu+-Gly配位反應配合物穩(wěn)定常數(shù)的測定。結果表明在導線表面電生金屬離子并結合零流電位法可用來研究溶液中不穩(wěn)定金屬離子的配位平衡，顯示出該方法在多價態(tài)金屬離子配位平衡研究方面的優(yōu)勢。
　　（2）將牛血清白蛋白（Bovine seru

4、m albumin，BSA）固定于碳棒導電材料（Carbon conducting material，CMC）表面，并置于含有吲哚美辛（Indomethacin，INM）的磷酸鹽緩沖溶液中，通過測量I-Eapp曲線和零流電位值Ezcp隨時間的變化，實現(xiàn)了對INM-BSA反應動力學的監(jiān)測；記錄I-Eapp曲線和零流電位值Ezcp隨INM濃度的變化，測定了反應的熱力學參數(shù)；并應用該方法測定藥品中INM的含量。結果表明，INM與BSA相互作用

5、的過程符合蘭繆爾單分子層結合，表觀結合速率常數(shù)ka為1.16×106(mol·l-1)-1·s-1；同等條件下，INM濃度在0~5.76×10-7mol·l-1范圍內，與BSA的結合比m（INM:BSA）為1:1，結合常數(shù)β為1.70×106l·mol-1；該方法用于INM定量測量時，檢測限為5.04×10-8mol·l-1，吲哚美辛腸溶片中INM含量測定結果與紫外測定結果一致。
　?。?）將BSA固定于CMC表面，并置于含有美洛

6、昔康（Meloxicam，MLX）的磷酸鹽緩沖溶液中，通過測量I-Eapp曲線和零流電位值Ezcp隨時間的變化，實現(xiàn)了對MLX-BSA反應動力學的監(jiān)測；記錄I-Eapp曲線和零流電位值Ezcp隨MLX濃度的變化，測定了反應的熱力學參數(shù)；并應用該方法測定了藥品中MLX的含量。結果表明，MLX與BSA相互作用的過程符合蘭繆爾單分子層結合，表觀結合速率常數(shù)ka為1.64×106(mol·l-1)-1·s-1；同等條件下，MLX濃度在0~5.0

7、4×10-7mol·l-1范圍內，與BSA的結合比m（MLX:BSA）為1:1，結合常數(shù)β為3.71×105l·mol-1；該方法用于MLX定量測量時，檢測限為2.16×10-8mol·l-1，美洛昔康藥劑中MLX含量檢測結果與紫外測定結果一致。
　?。?）用零流電位法測定拉米夫定（Lamivudine，LAM）的含量。以CMC為導電材料，將其置于磷酸鹽緩沖溶液中，通過測定零流電位值Ezcp隨LAM濃度的變化，得到Ezcp~?lo