陽離子脂質體吸附FLT3L基因腫瘤原位注射聯(lián)合順鉑治療小鼠結腸癌的實驗研究.pdf

1、目的:生物-化療即傳統(tǒng)的化治療與生物治療相結合的方法,是目前惡性腫瘤綜合治療的發(fā)展方向.在生物治療當中,以免疫細胞靶向的基因治療策略則是目前腫瘤生物治療臨床研究的熱點之一.F1t3L(Flt3 ligand,FL)是一種新近發(fā)現(xiàn)并克隆的、能夠刺激早期造血的細胞因子<'8>(cytokine).該因子通過與造血干細胞(HSC)以及早期免疫細胞表面酪氨酸激酶受體3(Flt3)結合,刺激造血干細胞(HSC)的增殖和分化<'20>,還能促進體內

2、淋巴細胞、樹突狀細胞(DC)、自然殺傷(NK)細胞增殖、分化和成熟,其中Flt3L對DC的生成具有明顯的協(xié)同作用<'17.18>;若與其它細胞因子合用,FL的作用還可以得到明顯加強.因其具有刺激造血和調節(jié)免疫的雙重作用,故在激發(fā)有效的抗腫瘤免疫<'30>、造血干細胞動員<'22>、保護大劑量放化療對骨髓的損傷<'21.26>、方面有良好的臨床應用前景.該實驗采用BALB/c小鼠建立結腸癌模型,鼠可溶性Flt3L真核表達質粒用陽離子脂質體

3、吸附后,在荷瘤小鼠瘤內進行原位注射,在腫瘤局部表達后通過與免疫細胞表面的Flt3受體結合,在腫瘤局部激發(fā)有效的抗腫瘤免疫,從而達到抑制腫瘤生長的目的;并同時聯(lián)合使用化療藥物(順鉑),探討Flt3L基因腫瘤原位注射聯(lián)合化療臨床治療腫瘤的可行性.材料和方法:在6-8周齡的雌性BALB/c小鼠建立CT26結腸癌實體瘤模型;小鼠右側腋下接種CT26結腸腺癌細胞2×10<'5>,1周后待腫瘤生長到直徑約1~2毫米時,將荷瘤小鼠隨機分為4組,每組1

4、0只:A對照組:生理鹽水0.1ml/只,瘤內注射,每周2次,連續(xù)2周;B化療組:順鉑(2mg/Kg小鼠LDs的1/3),0.1ml/只,腹腔內注射,每周一次,連續(xù)兩次;C基因治療組(FL組):陽離子脂質體吸附Flt3L質粒(1mg/ml)0.1ml/只,瘤內注射,每周2次,連續(xù)2周;D聯(lián)合治療組:劑量分別同B組與C組,其中陽離子脂質體吸附Flt3L質粒于腫瘤接種后第7、9、11、14天注射,化療于第8、15天注射.觀察小鼠腫瘤大小,腫瘤