三肽化合物酪絲纈肽對(duì)肺癌轉(zhuǎn)移的治療作用及對(duì)整合素-粘附斑激酶(FAK)信號(hào)傳導(dǎo)通路影響的研究.pdf

1、目的：
　　 觀察三肽化合物酪絲纈肽（tyroservatide，YSV）對(duì)人肺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的治療作用，初步探討其影響整合素.粘附斑激酶（focal adhension kinase，F(xiàn)AK）信號(hào)傳導(dǎo)通路的可能作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.應(yīng)用MTS法觀察YSV對(duì)體外培養(yǎng)的三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞與Matrigel膠粘附能力的影響。
　　 2.應(yīng)用Transwe

2、ll小室實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀^察YSV對(duì)體外培養(yǎng)的三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　 3.應(yīng)用明膠酶譜分析法，觀察YSV對(duì)三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞培養(yǎng)上清中基質(zhì)金屬蛋白酶（marx metalloproteinases，MMPs）MMP-2和MMP-9蛋白活性的影響；應(yīng)用免疫印跡技術(shù)觀察YSV對(duì)三種肺癌細(xì)胞中MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)的影響；應(yīng)用

3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR觀察YSV對(duì)三種肺癌細(xì)胞中MMP-2和MMP-9 mRNA水平的影響。
　　 4.應(yīng)用免疫印跡技術(shù)觀察YSV對(duì)三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞中FAK Tyr397和FAK Tyr576/577磷酸化水平的影響；應(yīng)用免疫印跡技術(shù)觀察YSV對(duì)三種肺癌細(xì)胞中FAK蛋白表達(dá)的影響；應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR觀察YSV對(duì)三種肺癌細(xì)胞中FAKmRNA水平的影響。
　　 5.應(yīng)用流式細(xì)胞

4、術(shù)觀察YSV對(duì)三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞中整合素β1和整合素β3蛋白表達(dá)的影響；應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR觀察YSV對(duì)三種肺癌細(xì)胞中整合素β1和整合素β3 mRNA水平的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.YSV可以顯著抑制三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞在體外與Malrigel膠的粘附，對(duì)三種肺癌細(xì)胞的最高抑制率分別可達(dá)37.08％，36.87％和41.34

5、％。
　　 2.YSV可以顯著抑制三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞的體外侵襲能力，對(duì)三種肺癌細(xì)胞的最高抑制率分別可達(dá)53.87％，62.10％和64.44％。
　　 3.YSV可以顯著抑制三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞培養(yǎng)上清中MMP-2和MMP-9的蛋白活性；YSV可以顯著抑制三種肺癌細(xì)胞中MMP-2和MMP-9的mRNA水平及蛋白表達(dá)。
　　

6、4.YSV可以顯著降低三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞中FAK Tyr397和FAK Tyr576/577的磷酸化水平；YSV可以顯著抑制三種肺癌細(xì)胞中FAK的mRNA水平及蛋白表達(dá)。
　　 5.YSV可以顯著抑制三種高轉(zhuǎn)移性人肺癌細(xì)胞株95D，A549和NCI-H1299細(xì)胞中整合素β1和整合素β3的mRNA水平及蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)論：
　　 YSV對(duì)肺癌細(xì)胞的體外粘附和侵襲能