酪絲纈肽(YSV)對肺癌的治療作用及影響組蛋白乙?；瘜毎芷谡{(diào)控的機制研究.pdf

1、目的：
　　 研究三肽化合物酪絲纈肽（Tyroservatide，YSV）在體內(nèi)外的抗肺癌作用，初步探討其影響人肺癌細胞組蛋白乙?；揎?，阻抑細胞周期進程，促進腫瘤細胞凋亡的可能機制。
　　 方法：
　　 1.應用MTS法和中空纖維測定法觀察YSV對人肺癌NCI-H292細胞體外和體內(nèi)生長的影響。
　　 2.應用Annexin V/PI雙染法、DNA Ladder檢測方法觀察YSV對人肺癌NCI-H292

2、細胞的凋亡誘導作用；并以流式細胞術(shù)觀察YSV對人肺癌NCI-H292細胞的細胞周期的影響。
　　 3.應用實時熒光定量PCR和Western Blot方法觀察YSV對人肺癌NCI-H292細胞周期蛋白依賴激酶抑制因子p21、p27的mRNA和蛋白表達的影響。
　　 4.應用Western Blot方法，觀察YSV對人肺癌NCI-H292細胞組蛋白乙?；疕3、H4水平的影響；應用熒光檢測技術(shù)和分光光度法分別觀察YSV對人肺

3、癌NCI-H292細胞的組蛋白去乙?；福℉DAC）和組蛋白乙?；福℉AT）活性的影響。
　　 5.應用染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）方法，觀察YSV對人肺癌NCI-H292細胞的細胞周期蛋白依賴激酶抑制因子p21、p27啟動子相關(guān)組蛋白乙酰化程度的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.YSV在體外（0.2～3.2mg/ml）和體內(nèi)（160～320μg/kg/d）均能夠明顯抑制人肺癌NCI-H292細胞的增殖（P<0.0

4、5）。
　　 2.YSV（0.8，1.6mg/ml）能夠誘導人肺癌NCI-H292細胞凋亡，使凋亡細胞數(shù)明顯增多，形成明顯的DNA Ladder；能夠阻抑人肺癌NCI-H292細胞的細胞周期進程，使S期細胞百分比明顯增高，G2/M期百分比明顯降低（P<0.05）。
　　 3.YSV能夠上調(diào)人肺癌NCI-H292細胞的細胞周期蛋白依賴激酶抑制因子p21、p27的表達。
　　 4.YSV能夠上調(diào)人肺癌NCI-H292

5、細胞組蛋白H3和H4的乙酰化水平；抑制組蛋白去乙?；傅幕钚裕瑢M蛋白乙?；傅幕钚晕匆娒黠@影響。
　　 5.YSV能夠誘導人肺癌NCI-H292細胞的細胞周期蛋白依賴激酶抑制因子p21、p27基因啟動子區(qū)域組蛋白乙?；皆黾樱せ頿21、p27基因的轉(zhuǎn)錄，誘導細胞周期阻滯。
　　 結(jié)論：
　　 YSV能夠明顯抑制人肺癌NCI-H292細胞的體內(nèi)外增殖，阻抑腫瘤細胞的細胞周期，誘導凋亡。其作用機制是通過抑制人肺