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文檔簡介
1、在人胎盤發(fā)育過程中,滋養(yǎng)層細(xì)胞對子宮內(nèi)膜血管的入侵至關(guān)重要。滋養(yǎng)層細(xì)胞的整個入侵過程是先進(jìn)入毛細(xì)血管、再遷移至子宮螺旋動脈并在此過程中對子宮動脈血管系統(tǒng)進(jìn)行重構(gòu)。這一遷移過程提示,滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移方向是與血液的流動方向相反的,即滋養(yǎng)層細(xì)胞是逆血流而上的。為了弄清滋養(yǎng)層細(xì)胞在妊娠過程中的生理作用以及入侵子宮脈管系統(tǒng)的機理,學(xué)術(shù)界已做了大量卓有成效的工作,但是關(guān)于滋養(yǎng)層細(xì)胞在血管系統(tǒng)中逆流遷移機制的研究卻極其有限。因此,為了深入了解和認(rèn)識體
2、內(nèi)滋養(yǎng)層細(xì)胞逆血流遷移行為和調(diào)節(jié)機制,本文從細(xì)胞粘附分子的角度分析了滋養(yǎng)層細(xì)胞β1整合素的表達(dá)與其遷移行為的相關(guān)性。本論文的具體研究工作和結(jié)論如下:
首先,本文建立了一種簡單穩(wěn)定的人體滋養(yǎng)層細(xì)胞原代培養(yǎng)方法。結(jié)果表明:采用胰酶+DNA酶輔助消化的方法可顯著提高原代培養(yǎng)滋養(yǎng)層細(xì)胞的產(chǎn)量;同時,通過Percoll非連續(xù)梯度離心以及相應(yīng)的差速貼壁和機械刮除等純化步驟后得到的滋養(yǎng)層細(xì)胞純度相對較高,可達(dá)95%以上,且細(xì)胞形態(tài)單一,生長
3、穩(wěn)定,細(xì)胞活力強。這說明本文采用的方法適合滋養(yǎng)層細(xì)胞的分離、純化和體外培養(yǎng)。
本文還采用微管吸吮技術(shù)對滋養(yǎng)層細(xì)胞的粘附力學(xué)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:滋養(yǎng)層細(xì)胞的粘附力隨I型鼠尾膠原濃度的增加而呈顯著的線性增加趨勢,表現(xiàn)出明顯的濃度依賴關(guān)系。當(dāng)與內(nèi)皮細(xì)胞接觸時,滋養(yǎng)層細(xì)胞表現(xiàn)出較高的粘附力,表明與內(nèi)皮細(xì)胞的接觸可顯著增強滋養(yǎng)層細(xì)胞的粘附力學(xué)行為。此外,本文還從粘附分子的角度對滋養(yǎng)層細(xì)胞與膠原和內(nèi)皮細(xì)胞的粘附力學(xué)特征進(jìn)行了分析,結(jié)
4、果提示在滋養(yǎng)層細(xì)胞的粘附過程中,β1整合素也起著重要的調(diào)節(jié)作用。
最后,本文研究了體內(nèi)絨毛組織和體外培養(yǎng)的滋養(yǎng)層細(xì)胞整合素表達(dá)的特性。結(jié)果表明:β1整合素在遷移顯型滋養(yǎng)層細(xì)胞上高度表達(dá)。在剪切應(yīng)力作用下,滋養(yǎng)層細(xì)胞β1整合素的表達(dá)隨剪切應(yīng)力作用的時間的延續(xù)而顯著變化,剪切應(yīng)力增強了滋養(yǎng)層細(xì)胞β1整合素的表達(dá)。當(dāng)滋養(yǎng)層細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)時,β1整合素的表達(dá)較單獨培養(yǎng)時顯著增強。這些結(jié)果提示,β1整合素在滋養(yǎng)層細(xì)胞對內(nèi)皮細(xì)胞的粘
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