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文檔簡介
1、目的:研究刺糖中多糖的最佳提取工藝條件并對刺糖粗多糖進行分離純化;研究刺糖中多糖的性質,單糖組成及抗氧化活性;并對得到的化合物的初步結構分析。
方法:1.采用正交試驗法確定刺糖中多糖的最佳提取工藝條件。2.采用DEAE-52纖維素及Sephadex G-150凝膠柱色譜分離方法對最佳工藝條件下提取得到的刺糖粗多糖進行分離純化。3.研究刺糖多糖經纖維素柱分離得到的流分S1的理化性質并采用TLC法對其單糖組成進行初步分析。4.
2、通過紫外光譜,紅外光譜及核磁共振譜對得到的化合物進行初步的結構分析。5.研究刺糖中多糖的抗氧化活性。6.采用熒光法測定刺糖中氨基酸含量。
結果:1.確定刺糖中粗多糖的最佳工藝條件為:在70℃下用9倍的水量,回流提取1.5h,醇沉濃度為80%。2.采用最佳提取工藝提取粗多糖并在提取過程中得到兩個化合物,粗多糖經過DEAE-52纖維素柱分離得到六個級分S1,S2,S3,Y1,Y2,Y3。3.初步確定主要單糖組成為葡糖糖。4.通
3、過結構分析得出兩個化合物分別為D-Glu-1α→2β-D-Fru,D-Glu-1β→6-D-Glu-1α-2β-D-Fru。5.通過對刺糖粗多糖的抗氧化活性研究得出:多糖組分S1具有較好清除羥自由基的功效,清除率隨濃度增加而增大;并且其在700nm處的吸光度值隨濃度的增加而增大,說明其有較強的還原能力,是良好的抗氧化劑.6.熒光法測定氨基酸平均含量為0.9163mg·g-1。
結論:1.通過驗證試驗得出驗證結果與正交實驗結
4、果相近,說明該工藝基本穩(wěn)定、可行。2.采用DEAE-52纖維素柱達到分離的效果,得出不同級分。3.TLC法初步判斷出多糖的單糖組成主要為葡萄糖。4.通過對得到的化合物進行結構分析得出二糖和三糖的結構。5.刺糖多糖對自由基的清除作用和抗氧化作用可以阻扼自由基的氧化性損傷,從而保護細胞功能對防治某些疾病有重要意義。6.熒光法操作簡單,快速準確,測定靈敏度最高,檢出限達9.70×10-7 mol·L-1,是天然藥物中氨基酸含量測定的較佳方法。
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