SOCS3基因轉(zhuǎn)染延長同種異體小鼠心臟移植物生存時間及其機制.pdf

1、目的：應(yīng)用小鼠同種異體心臟移植模型研究SOCS3（Suppressor of cytokinesignaling 3）對移植心臟的存活時間，炎性細(xì)胞的浸潤情況，以及體內(nèi)T細(xì)胞亞群分化的影響。
　　 方法：實驗以BALB/C(H-2d)為供者，C57BL/6J(H-2b)為受者，進(jìn)行小鼠同種異體心臟移植，共分三組即SOCS3組、PBS組和空載體組，每組8 對。術(shù)前3天，各組每天分別將100μg 真核表達(dá)質(zhì)粒pEF-FLAG-I/m

2、SOCS3、300μlPBS和100μg空載質(zhì)粒經(jīng)尾靜脈注射供者和受者，術(shù)后繼續(xù)連續(xù)三天注射受者。觀察各組4只受者移植心臟的存活時間，繪制生存時間曲線。各組其余4只受者在術(shù)后不同時間點用HE 染色檢法觀察不同移植心臟的病理改變，免疫組織化學(xué)法檢測移植心臟CD3、F4/80、Gr1、SOCS3、STAT3和pSTAT3的表達(dá)情況，并用流式細(xì)胞術(shù)檢測脾細(xì)胞中T細(xì)胞亞群的比例變化。
　　 結(jié)果：①小鼠經(jīng)尾靜脈注射真核表達(dá)質(zhì)粒pEF-F

3、LAG-I/mSOCS3后免疫組織化學(xué)法檢測心臟能有效表達(dá)SOCS3。②PBS組、空載體組和SOCS3組移植心臟的平均生存時間及標(biāo)準(zhǔn)差分別為7.5±0.58天、7.75±0.5天和12.5±0.58天，統(tǒng)計學(xué)分析，SOCS3 能延長移植心臟的生存時間（P＜0.01）。③與PBS組和空載體組比較，SOCS3 處理組術(shù)后第4天移植心臟中T 淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的浸潤明顯減少，同時STAT3和pSTAT3的表達(dá)下調(diào)；術(shù)后第2天和第4天脾臟CD4

4、+IL17+細(xì)胞和CD8+IL17+細(xì)胞數(shù)量減少（P＜0.05），而CD4+細(xì)胞、CD4+IFNγ+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞和CD8+IFNγ+細(xì)胞無明顯變化（P>0.05）。
　　 結(jié)論：真核表達(dá)質(zhì)粒pEF-FLAG-I/mSOCS3 能在小鼠心臟組織中有效表達(dá)SOCS3，SOCS3 可通過抑制STAT3 磷酸化而阻斷STAT3 信號通路等機制，抑制CD4+IL-17+細(xì)胞和CD8+IL-17+細(xì)胞的分化，同時減少移植心臟T 淋巴細(xì)