炎癥表觀調(diào)控胰腺癌SOCS3基因轉(zhuǎn)錄的機(jī)制及意義.pdf

1、 博士學(xué)位論文 博士學(xué)位論文 炎癥 炎癥表觀調(diào)控胰腺癌 表觀調(diào)控胰腺癌 SOCS3 基因轉(zhuǎn)錄 基因轉(zhuǎn)錄的機(jī)制 的機(jī)制及意義 及意義 黃麗 黃麗 指導(dǎo)教師 指導(dǎo)教師 王興鵬 王興鵬 教授 教授 學(xué)科專業(yè) 學(xué)科專業(yè) 內(nèi)科 內(nèi)科學(xué)（消化系?。?（消化系?。?研究方向 研究方向 胰腺癌基礎(chǔ)與臨床 胰腺癌基礎(chǔ)與臨床 申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別 申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別 博士學(xué)位 博士學(xué)位 學(xué) 號(hào) 0137249300 培養(yǎng)單位 培養(yǎng)單位 上海市第一人民

2、醫(yī)院 上海市第一人民醫(yī)院 答辯日期 答辯日期 2016 年 5 月 4 本課題得到國(guó)家自然科學(xué)基金（編號(hào)：NO81372643、NO81370568）資助。 上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文 中文摘要 I 炎癥表觀調(diào)控胰腺癌 炎

3、癥表觀調(diào)控胰腺癌 SOCS3 基因轉(zhuǎn)錄的機(jī) 基因轉(zhuǎn)錄的機(jī)制及意義 制及意義 摘 要 研究目 研究目的： 的：炎性微環(huán)境在以顯著的纖維炎癥反應(yīng)為特征的胰腺癌發(fā)病中起重要作用。 STAT3 通路是公認(rèn)的連接炎癥與腫瘤的 “橋梁” ， 參與了胰腺癌的發(fā)生發(fā)展。近年來(lái)，有關(guān) JAK/STAT 通路關(guān)鍵的負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子-SOCS3 在各種腫瘤中的研究越來(lái)越多，但胰腺癌相關(guān)的報(bào)道較少。本研究旨在探索胰腺癌中 SOCS3 的表達(dá)調(diào)控機(jī)制及其作用，為

4、治療提供新的理論基礎(chǔ)和潛在的治療靶點(diǎn)。 研究方法 研究方法：1、通過(guò) Western blot 和 IHC 檢測(cè) IL-6/pSTAT3/SOCS3 通路及DNMT1/DNMT3a 在胰腺癌及配對(duì)的癌旁組織、細(xì)胞株中的表達(dá)差異。2、通過(guò)Western blot 和 qRT-PCR 研究了炎性細(xì)胞因子 IL-6 及 STAT3 活性抑制劑 S3I-201對(duì)胰腺癌細(xì)胞 SOCS3 及甲基化轉(zhuǎn)移酶 DNMT1/DNMT3a 表達(dá)的影響。3、通

5、過(guò)MSP 檢測(cè) IL-6 及 S3I-201 對(duì) SOCS3 基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)的影響，并研究5-Aza-cdR 處理及 DNMT1 基因敲除對(duì) IL-6 誘導(dǎo)的 SOCS3 蛋白表達(dá)的影響。4、通過(guò)免疫共沉淀及雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)探索 IL-6/STAT3 通路及 DNMT1 對(duì)SOCS3 基因啟動(dòng)子區(qū)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用。5、通過(guò)增殖凋亡、周期、遷移、侵襲、裸鼠成瘤等實(shí)驗(yàn)觀察 SOCS3 基因?qū)σ认侔┘?xì)胞生物學(xué)行為的影響。 6、 利

6、用人胰腺癌組織芯片驗(yàn)證 SOCS3 表達(dá)與胰腺癌的臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性。 研究 研究結(jié)果： 果：1、胰腺癌組織中 IL-6、pSTAT3 及 DNMT1 表達(dá)上調(diào)，SOCS3 表達(dá)下調(diào)。2、IL-6 通過(guò)活化 STAT3 信號(hào)通路促進(jìn) DNMT1 的表達(dá)及胰腺癌細(xì)胞 DNA整體甲基化水平的提高；STAT3 活化可負(fù)性調(diào)控 SOCS3 表達(dá)。3、STAT3 活化促進(jìn)了 SOCS3 基因啟動(dòng)子的高甲基化；沉默 DNMT1 表達(dá)或 5-