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1、目的:通過(guò)檢測(cè)肝硬化門(mén)脈高壓癥脾亢患者肝脾組織鐵含量、肝組織轉(zhuǎn)鐵蛋白受體在蛋白及基因水平的表達(dá)情況和血中腫瘤壞死因子-α的表達(dá),來(lái)初步探討不同程度脾功能亢進(jìn)(脾亢)的肝硬化門(mén)脈高壓癥脾亢患者鐵代謝紊亂及其促進(jìn)肝硬化的作用機(jī)制。 方法:實(shí)驗(yàn)分組:健康對(duì)照組、輕度脾亢組、中度脾亢組和重度脾亢組;各組術(shù)前術(shù)后自身對(duì)照。采用RT-PCR和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)在基因水平和蛋白水平的表達(dá);原子吸收分光光度計(jì)法測(cè)量脾組織
2、、肝組織鐵的含量;ELISA法檢測(cè)肝硬化脾亢患者外周靜脈血肝硬化相關(guān)細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)。應(yīng)用SPSS13.0醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件分析各基因及蛋白表達(dá)的差異及相關(guān)性。 結(jié)果:肝脾組織鐵含量組間比較三組肝硬化組均大于對(duì)照組,結(jié)果有顯著差異(P<0.05);輕度與中度脾亢組比較脾臟鐵含量差異無(wú)顯著性(P>0.05),可能與病例數(shù)過(guò)少有關(guān),其余各組間鐵含量比較均有顯著差異(P<0.05);肝組織鐵含量隨脾亢程度加重鐵含
3、量隨之增加(P<0.05),脾組織鐵含量升高與肝組織鐵含量升高存在明顯相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)r=0.741,P<0.01);RT-PCR結(jié)果顯示各組間TfR mRNA表達(dá)水平結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),TfR mRNA的表達(dá)脾亢組均高于正常對(duì)照組,三組脾亢組之間隨脾亢程度的加深,TfR mRNA表達(dá)依次增加(P<0.05);脾亢三組肝組織免疫組織化學(xué)染色結(jié)果TfR蛋白表達(dá)均大于正常對(duì)照組;脾亢三組之間比較面密度未見(jiàn)明顯改變(P>0.0
4、5),而平均灰度明顯降低,差異有顯著性(P<0.05),積分光密度明顯升高,差異有顯著性(P<0.05);血標(biāo)本腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量組間比較結(jié)果各組之間差異均有顯著意義(P<0.05),肝硬化門(mén)脈高壓癥三組樣本均高于正常組,并且門(mén)脈高壓癥脾亢三組隨脾亢程度的加重,腫瘤壞死因子(TNF-α)吸光度依次增加(P<0.05)。脾亢組術(shù)前術(shù)后比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。外周血TNF-α表達(dá)升高與肝脾組織鐵含量升高存在明顯正
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