兒童惡性血液病免疫機(jī)制的研究及B-ALL MRD意義的探討.pdf

1、本文對兒童惡性血液病免疫機(jī)制的研究及B-ALL MRD的意義進(jìn)行了探討。本研究分為兩個(gè)部分。
　　 第一部分：實(shí)驗(yàn)部分。
　　 目的：通過檢測急性白血病及實(shí)體腫瘤患兒外周血Th1 、Th2 細(xì)胞因子表達(dá)水平，探討免疫機(jī)制在惡性血液病發(fā)病中的作用。
　　 方法：選取我院血液科確診并接受治療的急性白血病68 例，實(shí)體腫瘤20 例納入研究對象。按照不同的疾病進(jìn)行分組：急性白血病分為4 組，實(shí)體腫瘤分為2 組。采用流式細(xì)

2、胞術(shù)分別測定外周血Th1（IL-2,IFNγ）、Th2(IL-4)細(xì)胞因子及CD4+、CD8+T 細(xì)胞百分比。
　　 結(jié)果：⑴初診組IL-2 、 IFNγ 表達(dá)水平低于緩解組及正常對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05），緩解組與正常對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05）；三組IL-4 表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05）；緩解組CD4+/CD8+低于初診組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05），與正常對照組相比，差

3、異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05）。⑵誘導(dǎo)治療達(dá)完全緩解時(shí)IL-2 、 IFNγ 表達(dá)水平增高、IL-4 表達(dá)水平降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05），與正常對照組相比，IL-2 、IFNγ 、IL-4 表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05），CD4+/CD8+降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）。⑶CR ﹤6 月組IL-2 及IFNγ 表達(dá)水平高于CR 6-12 月組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）；CR 6-12

4、 月組IL-2 表達(dá)水平高于CR ﹥12 月組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）；三組IL-4 表達(dá)水平及CD4+/CD8+差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05）。⑷急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞因子表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05）；初診組及緩解組IL-2 與IFNγ 表達(dá)水平均呈正相關(guān)（r=0.695，P=0.006；r=0.383，P=0.008），IL-4 表達(dá)水平與前兩者無相關(guān)性（P ﹥0.05）。⑸CR

5、 ﹤6 月組感染率低于CR 6-12 月、CR ﹥12 月組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）。⑹實(shí)體腫瘤化療前IL-2 、IFNγ 表達(dá)水平低于正常對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）；化療后IFNγ 表達(dá)水平高于化療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）；化療前后，IL-2 、IL-4 表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹥0.05）。
　　 結(jié)論：①Th1/Th2 平衡失調(diào)可能參與了惡性血液病的發(fā)病；②隨著緩解時(shí)

6、間延長，急性白血病的免疫功能逐漸恢復(fù)正常，后期再次紊亂，可能與繼發(fā)免疫抑制有關(guān)，易并發(fā)嚴(yán)重感染。
　　 第二部分：臨床部分。
　　 目的：白血病患兒達(dá)到完全形態(tài)學(xué)緩解時(shí)，仍有少量白血病細(xì)胞殘留，即微小殘留病灶（minimal residual disease，MRD)，可作為一敏感指標(biāo)來評估臨床治療效果。目前MRD 的檢測方法有多種，其中流式細(xì)胞術(shù)方法檢測快速、簡便，能及時(shí)反映治療效果。、采用流式細(xì)胞術(shù)動態(tài)監(jiān)測B 系A(chǔ)L

7、L MRD，探討最佳檢測時(shí)機(jī)和臨床意義，作為個(gè)體化治療的評價(jià)依據(jù)。
　　 方法：以2004 年1 月至2009 年12 月我科確診并完成誘導(dǎo)治療的81例B 系急性淋巴細(xì)胞白血病患兒作為研究對象。初診時(shí)采用流式細(xì)胞術(shù)篩選白血病細(xì)胞標(biāo)志，隨后定時(shí)隨訪。
　　 結(jié)果：⑴療效轉(zhuǎn)歸及與MRD 關(guān)系：81 例患兒中，80 例誘導(dǎo)治療獲緩解，5 年無事件生存率（EFS）（76.80 ±5.70）％，其中標(biāo)危組（89.40±5.90）％

8、，中危組（66.99 ±13.6）％。81 例患兒中68 例篩選出特異性白血病細(xì)胞抗原作為MRD 監(jiān)測標(biāo)志，13 例未篩選出特異性白血病細(xì)胞抗原標(biāo)志，兩者5 年EFS 分別為（79.10 ±6.20）％，（62.50±15.10）％，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P ﹥0.05）。⑵誘導(dǎo)治療第35 天MRD 監(jiān)測顯示：68 例MRD 監(jiān)測患兒中，MRD 陰性（殘留白血病細(xì)胞﹤0.01％）52 例，5 年EFS（88.50 ±4.90）％；MRD陽性（殘

9、留白血病細(xì)胞≧0.01％）16 例，5 年EFS（42.10 ±20.10）％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ﹤0.05）。單因素分析提示MRD 監(jiān)測結(jié)果與危險(xiǎn)度分層相關(guān)。⑶誘導(dǎo)治療第55 天MRD 監(jiān)測顯示：誘導(dǎo)第35 天監(jiān)測MRD 陰性的52例患兒中，51 例仍為陰性，1 例陽性；而16 例第35 天MRD 陽性患者中，14 例（87.50％）轉(zhuǎn)為陰性，2 例仍陽性（后經(jīng)加強(qiáng)治療轉(zhuǎn)為陰性）。⑷動態(tài)隨訪：68 例患兒緩解后1 年內(nèi)MRD 陽