腺樣囊性癌臨床病理分析及腫瘤中RASSF1A的變化.pdf

1、目的:分析中國人群中唾液腺腺樣囊性癌(ACC)臨床病理特征及影響預(yù)后的因素，并探討RASSF1A基因、蛋白表達(dá)變化與該腫瘤臨床病理特征、預(yù)后的相關(guān)性。
　　方法:回顧性分析1985～2007年間我單位診斷為原發(fā)性ACC的474例病例，分析其臨床病理特征;截取2000～2007年間218例病例進(jìn)行隨訪，分析影響患者預(yù)后的臨床病理因素。BSP(亞硫酸鹽測序)和/或MSP(甲基化特異性PCR)對2000～2007年間的切片及蠟塊保存完整

2、的167例病例（其中50例有配對正常腺體）進(jìn)行RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化檢測，免疫組織化學(xué)(IHC)方法行蛋白表達(dá)檢測;基因掃描及直接測序法分析50對腫瘤及配對腺體組織中RASSF1A基因雜合性缺失(LOH)及突變情況。SPSS軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。同時(shí)，檢測ACC細(xì)胞系中去甲基化藥物處理前后RASSF1A基因甲基化、表達(dá)改變情況。
　　結(jié)果:
　　1.474例ACC中，男女之比為1.03∶1，發(fā)病高峰為40～69歲

3、，以腮腺和腭部最為常見。組織學(xué)類型為實(shí)體型與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.016)、年齡≥60歲(P=0.028)顯著相關(guān);血管侵犯與組織學(xué)類型為實(shí)體型(P=0.002)、腫瘤直徑≥4cm(P=0.008)、神經(jīng)侵犯(P=0.001)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.019)顯著相關(guān);發(fā)生在大唾液腺者多見于女性(P=0.005)、且易出現(xiàn)神經(jīng)侵犯(P=0.035)。
　　2.共收集到203/218(93％)例ACC患者隨訪資料。腫瘤組織學(xué)類型為實(shí)體型、

4、T分期大于2、N分期為N+、年齡≥60歲者疾病特異性生存期短;年齡≥60歲和切緣陽性者易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移;組織學(xué)類型為實(shí)體型者易局部復(fù)發(fā)。
　　3.35％(59/167)的腫瘤中存在RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化，后者與組織學(xué)類型為實(shí)體型(P=0.002)、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期(P=0.014)相關(guān)，且可作為患者總生存和無病生存的獨(dú)立預(yù)測因子;12％(6/50)的腫瘤中存在RASSF1A基因LOH，與組織學(xué)類型為實(shí)體型相關(guān)(P=0.0

5、29)，可作為患者總生存和無病生存的獨(dú)立預(yù)測因子，同時(shí)存在甲基化和LOH組，其預(yù)后差于單一存在甲基化/LOH組及不存在甲基化/LOH組;所有腫瘤中，均未檢測到RASSF1A基因突變，僅存在少量SNP(單核苷酸多態(tài)性)。
　　4.RASSF1A蛋白檢測結(jié)果顯示，66例腫瘤中表現(xiàn)為高表達(dá)，101例腫瘤中為低/不表達(dá)，低/不表達(dá)與腫瘤組織學(xué)類型為實(shí)體型(P=0.009)、TNM分期為Ⅲ/Ⅳ期(P=0.002)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.001

6、)、啟動(dòng)子區(qū)甲基化(P=0.012)明顯相關(guān)，且蛋白低表達(dá)組患者預(yù)后差于蛋白高表達(dá)組(P=0.014)。
　　5.去甲基化藥物Decitabine處理ACC細(xì)胞系后可使腫瘤細(xì)胞中RASSF1A表達(dá)升高。
　　結(jié)論:中國人群中，ACC患者的性別、年齡、部位等與其他人群中基本相同，腫瘤組織學(xué)類型為實(shí)體型、T分期大于2、N分期為N+、患者年齡≥60歲、切緣陽性在預(yù)后判斷中起一定作用。啟動(dòng)子區(qū)甲基化是ACC中RASSF1A基因失活的