人工蠶絲韌帶復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)前交叉韌帶損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、分類(lèi)號(hào)：泰山匿虧弦碩士學(xué)位論文論文題目：人工蠶絲韌帶復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)前交叉韌帶損傷的實(shí)驗(yàn)研究作 者 姓 名：楊繼祥學(xué) 科、專(zhuān) 業(yè)：外科學(xué)學(xué) 位 類(lèi) 型：科學(xué)學(xué)位研 究 方 向：骨科學(xué)指 導(dǎo) 教 師：賈慶衛(wèi)副教授入 學(xué) 時(shí) 問(wèn)：2 0 1 0 年9 月論文工作起止時(shí)問(wèn)：2 0 1 2 年2 月～2 0 1 3 年3 月愀刪人工蠶絲韌帶復(fù)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)前交叉韌帶損傷的實(shí)驗(yàn)研究研究生：楊繼祥專(zhuān)業(yè)：骨外科學(xué)導(dǎo)師：賈慶衛(wèi)副教授中文

2、摘要目的人工蠶絲韌帶( A r t i f i c i a ls i l k l i g a m e n t ) 作為生物材料支架，具有良好的生物相容性，沒(méi)有細(xì)胞毒性，并不引起炎性反應(yīng)，在組織工程己被廣泛應(yīng)用。蠶絲脫膠后，經(jīng)多種方法增大人工蠶絲韌帶的孔隙率，提高其與外周事物接觸的表面積，進(jìn)而增加骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞( B M S C s ) 在蠶絲韌帶上的粘附率。通過(guò)一定濃度骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在人工蠶絲蠶絲韌帶上貼附生長(zhǎng)，制成復(fù)合生物材料，替

3、代新西蘭大白兔的前交叉韌帶( A C L ) ，在膝關(guān)節(jié)微環(huán)境和動(dòng)力作用下，觀察復(fù)合材料的轉(zhuǎn)變，并與正常韌帶做對(duì)比。為人工肌腱和韌帶等組織工程材料的制作提供一定的可行性。I ．實(shí)驗(yàn)流程1 ．1 制作人工蠶絲韌帶，用胰酶或碳酸鈉進(jìn)行脫膠，然后與I 型膠原蛋白復(fù)合，進(jìn)行冷凍干燥，再以E D C ( 1 ．乙基．3 郫．二甲基氨丙基) 碳二亞胺) ／N H S ( N 習(xí)陘基琥珀酰亞胺) 作為交聯(lián)試劑進(jìn)行膠原的交聯(lián)，再次冷凍干燥，環(huán)氧乙烷滅菌

4、備用。1 ．2 選取約一周左右新西蘭小白兔，取其骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，傳代培養(yǎng)并行流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞種類(lèi)。取第四代細(xì)胞，與備用的人工蠶絲韌帶復(fù)合7 天，形成復(fù)合材料。1 ．3 封閉群養(yǎng)新西蘭大白兔3 6 只，隨機(jī)分為3 組( 空白組，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組) ，每組1 2 只。在相同條件下分別去除其前交叉韌帶，保留殘端。在實(shí)驗(yàn)組中，用復(fù)合材料重建A C L 。2 ．觀察指標(biāo)2 ．1 不同預(yù)定時(shí)間各組分別隨機(jī)處死4 只動(dòng)物，觀察復(fù)合材料組織學(xué)、病理學(xué)