黃曲霉毒素B1對(duì)雛雞小腸黏膜免疫損傷影響的研究.pdf

1、小腸對(duì)于禽類(lèi)的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要意義，它不僅是消化吸收的主要場(chǎng)所，在黏膜免疫方面也發(fā)揮著重要作用。當(dāng)動(dòng)物攝入的日糧中含AFB1時(shí)，會(huì)導(dǎo)致小腸中含有較高濃度的AFB1，并且AFB1會(huì)對(duì)腸道產(chǎn)生不利影響。目前有關(guān)AFB1對(duì)動(dòng)物機(jī)體毒副作用的研究逐漸被人們重視，也取得了一定的成果，然而關(guān)于AFB1對(duì)小腸黏膜免疫影響的研究鮮有報(bào)道。本研究選用1日齡科寶肉雞健雛156只，隨機(jī)分為2組分別飼喂對(duì)照組日糧(0mg/kg AFB1)和AFB1組日糧(0.

2、6mg/kg AFB1)21日。用光鏡、電鏡技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、SABC免疫組化染色和qRT-PCR等方法研究日糧中AFB1對(duì)雛雞小腸黏膜免疫相關(guān)因子的動(dòng)態(tài)變化，探討AFB1對(duì)雛雞小腸黏膜免疫功能影響的規(guī)律及作用機(jī)理。其結(jié)果如下:
　　與對(duì)照組相比，AFB1組雛雞體重在7、14和21日齡時(shí)顯著降低(p＜0.01或p＜0.05)。光鏡和電鏡結(jié)果顯示AFB1組十二指腸、空腸和回腸絨毛上皮脫落;吸收細(xì)胞微絨毛脫落，線(xiàn)粒體嵴斷裂且內(nèi)容物發(fā)生

3、溶解呈空泡狀，胞質(zhì)電子密度降低，細(xì)胞連接不規(guī)則。與對(duì)照組相比，AFB1組的十二指腸、空腸和回腸絨毛高度和絨毛隱窩比值顯著降低(p＜0.01或p＜0.05)，而隱窩深度顯著升高(p＜0.01或p＜0.05)（除7日齡十二指腸和空腸微絨毛高度和7，14日齡回腸微絨毛高度;7日齡十二指腸和回腸絨毛隱窩比值以及隱窩深度以外）。試驗(yàn)期間AFB1組小腸杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著低于對(duì)照組(p＜0.01或p＜0.05)（除7日齡十二指腸和回腸以外）。
　

4、　流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示AFB1組十二指腸固有層CD3+淋巴細(xì)胞比率在14和21日齡時(shí)顯著(p＜0.05)低于對(duì)照組;AFB1組十二指腸上皮和固有層CD3+CD4+淋巴細(xì)胞在14和21日齡時(shí)顯著(p＜0.01或p＜0.05)低于對(duì)照組，而CD3+CD8+淋巴細(xì)胞僅在21日齡時(shí)顯著(p＜0.01或p＜0.05)低于對(duì)照組。試驗(yàn)期間，AFB1組空腸和回腸上皮及固有層CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+淋巴細(xì)胞比率變化規(guī)律與十二指腸相

5、似均在不同程度上低于對(duì)照組。
　　實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示試驗(yàn)期間，AFB1組回腸的IL-2，IL-4，IL-6和TNF-αmRNA表達(dá)量均較對(duì)照組顯著降低(p＜0.05或p＜0.01)（7日齡IL-2除外），而十二指腸和空腸的mRNA表達(dá)量?jī)H在試驗(yàn)第14和21日齡顯著降低(p＜0.05或p＜0.01)。與對(duì)照組相比AFB1組的IL-10 mRNA表達(dá)量?jī)H在各個(gè)腸段21日齡和回腸的14日齡顯著降低(p＜0.05或p＜0.01)。

6、AFB1組的IL-17 mRNA表達(dá)量則在14和21日齡的十二指腸和回腸以及試驗(yàn)期間的空腸顯著低于對(duì)照組（p＜0.05或p＜0.01）。AFB1組的IFN-γmRNA表達(dá)量在試驗(yàn)期間的十二指腸，21日齡的空腸以及14和21日齡的回腸顯著低于(p＜0.05或p＜0.01)對(duì)照組。
　　試驗(yàn)期間，AFB1組的plgR、IgM、IgA和IgG mRNA相對(duì)表達(dá)量在十二指腸，空腸和回腸顯著低于對(duì)照組(p＜0.05或p＜0.01)（除7和1

7、4日齡十二指腸的IgAmRNA，7日齡空腸的IgA mRNA;7日齡十二指腸和空腸的pIgR和IgM mRNA;7和14日齡十二指腸的IgG mRNA和7日齡回腸的IgG mRNA以外）。
　　免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示AFB1組的IgA+細(xì)胞在試驗(yàn)14和21日齡在十二指腸，空腸和回腸均顯著低于對(duì)照組(p＜0.05或p＜0.01)。
　　結(jié)果表明:日糧中含有0.6mg/kg AFB1可致雛雞生長(zhǎng)發(fā)育受阻，引起十二指腸、空腸和回腸病